嗜铬颗粒蛋白B-GST融合蛋白表达载体的构建及其在人肠杆菌中的表达
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[摘要] 目的 构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromograninB,CgB)重组原核表达载体。方法 先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达。结果 表达产物经WesternBlot分析,在140处有一明显特异带,与预期结果相符。结论 构建重组融合表达载体pGEX-CgB,在原核细胞中成功表达出小鼠CgB-GST融合蛋白。
[关键词] RT-PCR;嗜铬颗粒蛋白B;基因表达
[中图分类号] Q 51
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