白刺花茎叶抗炎抗过敏作用的实验研究
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摘要：目的：对白刺花茎叶进行抗炎、抗过敏的实验研究并与花作比较。方法：抗炎实验采用二甲苯所致的小鼠耳肿胀的方法，二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高以及角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀的实验方法；抗过敏实验采用DNCB(2.4一二硝基氯苯)所致小鼠DTH(迟发性过敏反应)以及右旋糖酐所致小鼠皮肤瘙瘁等实验方法。结果：白刺花的茎叶和花对小鼠的耳肿胀，足趾肿胀有一定的抑制作用，同时可以降低小鼠毛细血管的通透性；对DNCB所致小鼠DTH影响不明显，还可以减少小鼠的瘙痒次数及瘙痒持续时间。结论：白刺花茎叶有一定的抗炎、抗过敏作用，但效果均不如花，由于茎叶的产量大，容易采集，对其化学成分和各种成分药效学有待进一步研究。
关键词：白刺花；茎叶；花；抗炎；抗过敏；实验研究
中图分类号：R285.5 文献标识码：A
文章编号：1007-2349(2009)05-0053-02
白刺花为蝶形花科植物白刺花(Sophroa viciifolia hance)。广泛分布于海拔1300m～2500m的山坡，路旁，灌木丛中。云南、贵州、四川、甘肃，河南，河北，山西等省均有分布。为汉族民间及苗族、哈尼族等少数民族习用药，云南省多数地区有食用其花的习俗。味苦性寒，具有清热燥湿，凉血解毒，利湿消肿等功效。主要用于湿热痢疾，咽喉肿痛，肝炎，皮肤瘙痒，滴虫性阴道炎。课题组前期做了花的化学成分及其抗炎、抗过敏的实验研究，表明其具有显著的抗炎抗过敏作用。但白刺花产量低，受花期季节限制，且不容易采集。民间有茎叶入药的报道，因此该实验在前期研究的基础上，拟进行白刺花茎叶总提物与花总提物抗炎抗、过敏作用的比较，观察二者的作用是否相似，为今后的开发和应用提供一定的实验依据，现报道如下。
1 实验材料
1.1 主要药品及试剂 扑尔敏，北京太洋药业有限公司(批号060610)；角叉菜胶，Sigma 015k0172(批号C1013-25G)；右旋糖酐，昆明南疆制药有限公司(批号A060725)；所用试剂均为市售合格试剂。
1.2 主要仪器 电子天平，PIA03；离心机，TLG-52商速台式冷冻离心机(江苏医疗仪器厂)；紫外分光光度计，7520(上海分析仪器厂)；旋转式蒸发器，RE-52(上海安亭电子仪器厂)。
1.3 实验动物 昆明种小白鼠，体重18～22g，雌雄兼用，由四川省医学科学院实验动物研究所提供，生产许可证号：SCXK(川)2004-16。
1.4 统计学处理 实验数据符合正态分布，方差齐者用￡检验，不齐者用t检验。实验数据如有偏态，则用参比差值法。
2 实验方法与结果
2.1 白刺花茎叶及花总提物的制备 药材采自昆明近郊小墨雨山上，由毛晓健副教授鉴定。将500g白刺花干燥的茎叶加入75%的乙醇3000mL，浸泡30min后于水浴上回流提取1h，滤过，收集滤液，药渣加75%乙醇2000mL水浴回流提取30min，滤过，和并滤液。滤液于减压浓缩到500mL(1g药材/mL)。花的总提物的制备方法同茎叶总提物的制备。置6℃冰箱中保存备用。
2.2 抗炎实验
2.2.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 18～22g小鼠60只，随机分5组，分组及给药剂量如表1所示。连续给药7天，于末次给药30min后，各小鼠右耳涂二甲苯30μL致炎，致炎后1h将小鼠颈椎脱臼处死，剪下左右耳廓，用打孔器打下7mm的耳片，电子天平称重。计算肿胀率。将取耳后的小鼠迅速剖开胸腔和腹腔，取出胸腺、脾脏，用电子天平称其鲜重并计算胸腺指数和脾脏指数，结果表明：与空白对照组比较，各给药组对二甲苯所致的耳廓肿胀均有极显著的抑制作用，并能显著降低脾脏指数。对胸腺指数影响不明显。见表1。[肿胀率一(右耳重一左耳重)/左耳重×100%]，[胸腺(脾脏)指数=胸腺(脾脏)重量(g)/lOg体重]
2.2.2 对二甲苯所致的小鼠皮肤毛细血管通透性的影响Ⅲ取18～22g小鼠60只，分组及给药剂量如表2所示。连续给药7d，于第6天将小鼠腹部正中的毛去出，于第7天末次给药60min后，各小鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰生理盐水溶液0.1mL/lOg，随即于皮肤上涂二甲苯30#L/只。30min后小鼠颈椎脱臼处死，剥下染蓝皮肤，用打孔器打下两块7mm蓝染皮肤，放入具塞的玻璃试管内，加入丙酮：生理盐水=7：3混合溶液5mL，置于37℃的恒温箱中孵化36h。2000转离心10min，取上清液，于610hm处比色测吸光度(A)。以空白丙酮生理盐水校零。结果表明：高剂量组能显著升高小鼠毛细血管的通逮性，低剂量组和花对照组差异不显著。见表2。
2.3.3 对角叉菜胶所致的小鼠足趾肿胀的影响 18～22g小鼠60只，雌雄兼有。随机分为5组，分组及给药剂量如表3所示。连续给药6d，给药剂量如表3。末次给药前测每只小鼠的后右足的足趾厚度，给药后30min每只小鼠右肢足趾皮下注射1%角叉菜胶混悬液0.1mL致炎，每隔1h测一次足趾厚度，连续测4次，记录结果，计算肿胀度(肿胀度=给药后足趾厚度一给药前足趾厚度)。结果表明：与空白组相比较，在给药后1h，各给药组对角叉菜胶所致小鼠的足趾肿胀抑制作用不显著，2h时候高剂量组，花对照组及阿司匹林组均有显著的抑制作用。3h后各给药组均有极显著的抑制作用。4h时只有花对照组有显著抑制作用。见表3。
2.4 抗过敏实验
2.4.1 对DNCB(2、4一二硝基氯苯)所致小鼠DTH(迟发性过敏反应)的影响取18～22g小鼠60只，雌雄各半，随机分5组，分组及给药剂量如表4所示。分组后开始灌胃给药，于给药第2d将鼠腹部去毛，以1%DNcB50μL均匀涂抹致敏。第3天强化致敏1次。给药第7天即致敏6d后，将DNCB丙酮液10μL。均匀的涂抹于小鼠右耳进行攻击。第8天即攻击后24h，于末次给药后1h，处死小鼠剪下左右耳廓，用打孔器打下7mm的耳片，称重，以左右耳片重量之差为肿胀度，并取胸腺，脾脏称重，计算胸腺指数，脾脏指数(计算方法同2.3，1)。结果表明：花对照组和扑尔敏对照组对DNCB所致的DTH有抑制作用，而茎叶高、低剂量组均无作用。低剂量组，花对照组对胸腺和脾脏指数均有明显的降低作用。见表4。
2.4.2 对右旋糖酐所致小鼠皮肤瘙痒的影响 取18～22g小鼠60只，雌雄兼用。随机分5组，分组及给药剂量如表5所示。连续给药7d。以末次给要后30min,各小鼠尾静脉注射0.04%右旋糖酐0.1mL/10g。以小鼠前爪搔头部，后爪搔躯干，嘴咬全身各个部位作瘙痒指征，记录30min内小鼠瘙痒次数及每次瘙痒的持续时间。结果表明：各实验组与空白组比较均能明显的降低右旋糖酐所致的小鼠皮肤瘙痒次数。其中高低剂量组和扑尔敏组能明显的减少小鼠持续瘙痒时间 ......
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