田皂角水提物药理作用的实验研究
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摘要：目的：观察田皂角水提物的药理作用。方法：采用试管法抗菌、耳廓肿胀法、扭体法、皮肤过敏试验和急性毒性试验，进行抗菌、抗炎、镇痛、抗过敏试验。结果：田皂角水提物可抗菌；减轻小鼠耳廓肿胀；减少小鼠扭体次数；降低皮肤过敏反应。急性毒性试验表明，田皂角水提物的最大给药量为150 g生药/kg。结论：田皂角水提物具有一定的抗菌、抗炎、镇痛和抗过敏作用。
关键词：田皂角水提物；药理试验；抗菌；抗炎；镇痛；抗过敏
中图分类号：R285文献标识码：A
文章编号：1007-2349(2011)12-0063-02
田皂角(Aeschynornene indicaL.)别名合萌、水皂角。为蝶形花科植物田皂角，分布于华北、华东、中南、西南等地。味甘、苦，性微寒。可清热利湿，祛风明目，通乳。主治热淋、血淋、水肿、泄泻、痢疾、目赤肿痛等症[1]。关于其化学成分和药理研究未见报道。本文根据其民间功用，对田皂角水提物进行相关药理试验，以期发现新的药用途径，为临床应用提供科学依据。现将研究报告如下。
1实验材料
1.1受试药物田皂角水提物(5.19 g生药/g膏)，由本院中药化学研究所提供。实验时用蒸馏水研磨配制成药液备用。阿司匹林肠溶片为武汉远大制药集团股份有限公司产品，批号：081101。地塞米松为天津药业集团新郑股份有限公司产品，批号：090611。息斯敏，西安杨森制药有限公司产品，批号090218967。
1.2动物昆明种小鼠，清洁级，体重18~22 g，雌雄各半。由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK桂2003—0003。小鼠分性别饲养于空调实验室内，室温：(22±2)℃，相对湿度：(60±2)%，喂颗粒标准饲料，自由饮水和摄食。
1.3仪器722型光栅分光光度计，上海分析仪器三厂产品。FA1004-型万分之一电子天平，上海精密科学仪器有限公司产品。
1.4统计学方法采用PEMS 3.1统计软件分析数据。所得实验数据以均数±标准差( ±s )表示，组间比较采用t检验。
2方法与结果
2.1抗菌试验取田皂角水提物用水配制成试验药液，115 ℃高压灭菌20 min，备用。采用液体试管二倍稀释法，用营养肉汤培养基、改良马丁培养基将供试液作系列稀释，使药液浓度为1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024，分装试管，每管1.0 mL，第11管作为阳性对照，第12管作为阴性对照。除阴性对照管外，每管接种100，000CFU/mL相应菌液0.1 mL，分别接种大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌。细菌置35 ℃~37 ℃培养24 h，真菌置25 ℃~28 ℃培养24~48 h，将各管培养物分别接种于相应的不含药物的琼脂培养基平板上，细菌置35 ℃~37 ℃培养24 h，真菌置25 ℃~28 ℃培养24~48 h，以生长菌落不超过5个者为田皂角水提物的最小抑菌浓度(MIC)。结果见表1。
表1田皂角水提物体外抑菌试验结果
试验菌种菌号药物最低抑菌浓度(MIC)稀释度药物浓度/mg•mL-1金黄色葡萄球菌260031∶3211.71表皮葡萄球菌260691∶1623.43大肠埃希杆菌441021∶1623.43乙型副伤寒沙门菌500941∶493.75福氏志贺氏菌515721∶846.87铜绿假单胞菌101041∶846.87枯草芽孢杆菌635011∶3211.71白色念珠菌101041∶1623.43结果表明，田皂角水提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有较强抗菌作用；对白色念珠菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌具有中度的抗菌作用；对乙型副伤寒沙门菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌具有低度抗菌作用。
2.2对醋酸所致小鼠扭体次数的影响[2]取小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组，田皂角水提物高、中、低剂量(15.0、7.5、5.0 g/kg)组和阳性药阿斯匹林(0.2 g/kg)组，每组10只。每天灌胃给药1次，空白对照组给予等体积蒸馏水，连续给予5 d。于末次给药后1 h，每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，立即观察并记录20 min内各小鼠的扭体次数。比较给药组与对照组之间的差异，评价受试药物的镇痛作用。结果见表2。
表2田皂角水提物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响( ±s ，n=10)
组别剂量/g•kg-1扭体次数空白对照组—19.8±13.9阿司匹林0.27.8±5.3*田皂角水提物15.08.8±6.1*田皂角水提物7.58.2±4.5*田皂角水提物5.012.9±10.3与空白对照组比较，*P<0.05
结果表明，与空白对照组比较，田皂角水提物大、中剂量组及阿司匹林组均明显减少小鼠扭体次数，提示田皂角水提物具有一定镇痛作用。
2.3对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用[3]取小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组，田皂角水提物高、中、低剂量(15.0、7.5、5.0 g/kg)组和阳性药地塞米松(0.0045 g/kg)组，每组10只。用药各组每天灌胃给药1次，空白对照组给予等体积蒸馏水，连续给予7 d。于末次给药0.5 h后，用微量注射器取(0.05 mL 2%)巴豆油溶液涂于小鼠右耳，待4 h后处死小鼠。立即用口径为8 mm的打孔器，沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后在电子天平上分别称重，以两耳片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标，并求出百分抑制率(%)。结果见表3。
表3田皂角水提物对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响( ±s ，n=10)
组别剂量/g•kg-1肿胀度/mg抑制率(%)空白对照组—17.09±4.39—地塞米松0.004511.62±4.14*32.0田皂角水提物15.013.25±2.55*22.5田皂角水提物7.512.98±3.11*24.0田皂角水提物5.013.90±5.6318.7与空白对照组比较，*P<0.05
结果表明，与空白对照组比较，田皂角水提物大、中剂量组及地塞米松组均可明显降低小鼠耳廓肿胀度，提示田皂角水提物具有抗炎作用。
2.4小鼠被动皮肤过敏试验[4]抗原：医用天花粉。佐剂：4%氢氧化铝凝胶。临用时以3.75 mg天花粉溶于1.5 mL氢氧化铝凝胶中。致敏：健康小鼠10只，体重18~22 g，将上述天花粉氢氧化铝凝胶混悬液脚掌注射，两只后脚掌各注入0.05 mL，共注射0.1 mL。15 d后，断头取血，离心取抗血清备用。
被动皮肤致敏：另取小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组，田皂角水提物高、中、低剂量(15.0、7.5、5.0 g/kg)组和阳性药息斯敏(0.01 g/kg)组，每组10只。每天ig给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续给予7 d。取上述血清(10只致敏小鼠的混合抗血清)加生理盐水稀释成1∶5，每鼠腹壁皮内注射两个点(相距0 ......
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