RP-HPLC测定拨云锭中龙胆苦苷的含量(2)
3 讨论
31 检测波长的选择 试验采用紫外可见分光光度计对龙胆苦苷的甲醇溶液进行扫描，结果于270 nm与253 nm波长处有最大吸收。由于253 nm波长处的吸收度低于270 nm波长处的吸收，从检测灵敏度的角度考虑，选择270 nm作为本次试验的检测波长。
32 提取溶剂的选择 龙胆苦苷为裂环环烯醚萜苷类成分[4]，易溶于甲醇、水，可溶于乙醇。考察了不同浓度的甲醇、乙醇和水为溶剂的提取结果，结果表明纯甲醇的龙胆苦苷提取率最高。故选择纯甲醇作为提取溶剂。
33 提取方法的考察 龙胆苦苷为热不稳定性成分，研究表明超声法和冷浸法所制备的供试品溶液中龙胆苦苷的含量明显高于索氏提取法和热回流法[5]。本次试验分别考察了以甲醇为溶剂的两种提取方法，分别为冷浸法，超声法。这两种提取方法中龙胆苦苷的含量无显著性差别。考虑到超声法与冷浸法相比，超声法更简单，易行，快捷，故采用超声法，以甲醇为提取溶剂。此外，本次试验对超声时间进行了考察，依次测定了超声提取5 min、10 min、15 min、30 min以及60 min龙胆苦苷含量测定的结果。结果表明采用纯甲醇为溶剂，超声提取15 min时，龙胆苦苷成分提取完全。
34 流动相的选择 本次试验参照文献考察了以甲醇-水为流动相的系统[6]与以乙腈-水为流动相的系统[7]，结果表明，以甲醇-水(30∶70)为流动相，可是龙胆苦苷的分离度，理论塔板数、峰的对称性及出峰时间达到满意的结果。
本次试验建立的高效液相色谱法测定拨云锭中龙胆苦苷的含量，该法灵敏、快速、准确，可用于拨云锭的质量控制。
参考文献：
[1]卫生部药品标准第二十册WS3—B—3875—98[S]. 1998：170
[2]王迪，郑英，陈金秀 拨云锭眼药对9种常见致病菌的体外抗菌作用观察[J].眼科研究，2002，20(4)：365~366
[3]宋鹏 拨云锭对家兔实验性角膜溃疡的治疗效应[J].现代应用药学，1989，(2)：1~2
[4]徐国钧，徐珞珊 中国药材学[M]. 北京：中国医药科技出版社，1996：365
[5]韩双，李玮，席先蓉 贵州不同地区坚龙胆中龙胆苦苷的含量测定[J]. 医药导报，2006，28(6)：783~785
[6]吴立宏，叶燕，李兴尚，等 反相高效液相色谱法测定道地产区秦艽药材中龙胆苦苷的含量[J]. 药物分析杂志，2009，29(2)：184~187
[7]李萍 高效液相色谱法测定风湿灵胶囊中龙胆苦苷含量[J]. 中国药业，2009，18(13)：25~26
(收稿日期：2012-04-28), 百拇医药(袁文娟 高文分)
31 检测波长的选择 试验采用紫外可见分光光度计对龙胆苦苷的甲醇溶液进行扫描，结果于270 nm与253 nm波长处有最大吸收。由于253 nm波长处的吸收度低于270 nm波长处的吸收，从检测灵敏度的角度考虑，选择270 nm作为本次试验的检测波长。
32 提取溶剂的选择 龙胆苦苷为裂环环烯醚萜苷类成分[4]，易溶于甲醇、水，可溶于乙醇。考察了不同浓度的甲醇、乙醇和水为溶剂的提取结果，结果表明纯甲醇的龙胆苦苷提取率最高。故选择纯甲醇作为提取溶剂。
33 提取方法的考察 龙胆苦苷为热不稳定性成分，研究表明超声法和冷浸法所制备的供试品溶液中龙胆苦苷的含量明显高于索氏提取法和热回流法[5]。本次试验分别考察了以甲醇为溶剂的两种提取方法，分别为冷浸法，超声法。这两种提取方法中龙胆苦苷的含量无显著性差别。考虑到超声法与冷浸法相比，超声法更简单，易行，快捷，故采用超声法，以甲醇为提取溶剂。此外，本次试验对超声时间进行了考察，依次测定了超声提取5 min、10 min、15 min、30 min以及60 min龙胆苦苷含量测定的结果。结果表明采用纯甲醇为溶剂，超声提取15 min时，龙胆苦苷成分提取完全。
34 流动相的选择 本次试验参照文献考察了以甲醇-水为流动相的系统[6]与以乙腈-水为流动相的系统[7]，结果表明，以甲醇-水(30∶70)为流动相，可是龙胆苦苷的分离度，理论塔板数、峰的对称性及出峰时间达到满意的结果。
本次试验建立的高效液相色谱法测定拨云锭中龙胆苦苷的含量，该法灵敏、快速、准确，可用于拨云锭的质量控制。
参考文献：
[1]卫生部药品标准第二十册WS3—B—3875—98[S]. 1998：170
[2]王迪，郑英，陈金秀 拨云锭眼药对9种常见致病菌的体外抗菌作用观察[J].眼科研究，2002，20(4)：365~366
[3]宋鹏 拨云锭对家兔实验性角膜溃疡的治疗效应[J].现代应用药学，1989，(2)：1~2
[4]徐国钧，徐珞珊 中国药材学[M]. 北京：中国医药科技出版社，1996：365
[5]韩双，李玮，席先蓉 贵州不同地区坚龙胆中龙胆苦苷的含量测定[J]. 医药导报，2006，28(6)：783~785
[6]吴立宏，叶燕，李兴尚，等 反相高效液相色谱法测定道地产区秦艽药材中龙胆苦苷的含量[J]. 药物分析杂志，2009，29(2)：184~187
[7]李萍 高效液相色谱法测定风湿灵胶囊中龙胆苦苷含量[J]. 中国药业，2009，18(13)：25~26
(收稿日期：2012-04-28), 百拇医药(袁文娟 高文分)