Westem印迹法检测ERKI/2、p38和JNK蛋白表达2.3.1 心肌采集，蛋白提取各组于灌喂不同药物4周后各取3只大鼠，腹腔注射麻醉处死大鼠，仰卧固定四肢，取出心脏，冰生理盐水冲洗，滤纸吸干称重，匀浆，心肌组织蛋白提取，- 80℃保存备用。2.3.2制备SDS - PAGE凝胶，组装电泳槽将灌胶玻璃板洗净，晾干固定，配制10%分离胶8 mL快速灌入凝胶玻璃槽中；立即用去离子水覆盖胶面，室温放置约40 min至分离胶凝固；配制5%浓缩胶4 mL；倒掉去离子水覆盖液，并用吸水纸吸掉残留的液体；将凝胶板重新垂直放置，轻轻加入5%浓缩胶液，插入样品梳，室温凝胶约40 min。轻轻拔去梳子，将玻璃夹板“凹”面贴紧电泳槽，固定在电泳槽上。2.3.3样品变性及电泳、凝胶转膜及曝光、洗片、扫描由一80℃冰箱取出提取的组织总蛋白样品，根据蛋白定量结果，加入相应体积的总蛋白样品与5×蛋白质凝胶电泳上样缓冲液混合，95℃变性10 min，将电压调至80V，使样品通过浓缩胶与分离胶(电压约8v/cm)。电泳使染料至分离胶适当位置，结束电泳。凝胶电泳结束后，将凝胶上分离到的蛋白条带通过转移电泳方式转印至PVDF膜上，然后分别用非标记·抗及辣根过氧化物酶标记的二抗对其进行孵育，洗膜，曝光洗片.，采用美国UVP分析仪器，对胶片进行扫描，然后括住每·个条带，系统自动生成灰度值，即为结果。2.4统计学处理计量资料以均数±标准差表示 ......