HPLC法测定熊胆汁中牛磺熊去氧胆酸含量的研究(2)
通过实验结果显示,利用乙醇作为稀释剂存在拖尾,n<2000;而甲醇作为稀释剂,峰型尖锐,无拖尾及前沿现象,n>4500,故选择甲醇作为稀释剂。2.3对照品溶液制备取牛磺熊去氧胆酸钠对照品适量,精密称定,加甲醇使溶解并定量稀释制成每1 mL含1 mg的溶液,即得。
2.4供试品制备取熊胆汁不少于25 mL,过120目标准筛,精密量取续滤液1 mL置100 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
2.5线性关系考察精密称取牛磺熊去氧胆酸钠对照品28.5 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度,摇匀。再分别精密吸取上述对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0 mL置5 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀得系列浓度对照品溶液。取系列浓度对照品溶液各5 μL,注入液相色谱仪,按上述方法测定。以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,得回归方程为:
A=281822.207.C-1614.773r=0.9999
结果表明:TUDCA进样浓度在0.1045 mg/mL~1.045 mg/mL之间呈良好的线性关系 ......
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