HPLC法测定八角莲中3种活性成分含量的研究(2)
26稳定性试验取同一份样品溶液，按“21”项色谱条件，分别于0、3、6、16、20h进样，测定峰面积，槲皮素、鬼臼毒素、山柰素峰面积的RSD%(n=5)分别为：091%、079%、059%，结果表明供试品溶液在20 h内稳定。
27样品测定取12批样品按上述供试品制备方法制备，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，按上述“21”项色谱条件测定，记录峰面积，以外标法计算样品中槲皮素、鬼臼毒素、山柰素的含量，结果见表2。
3讨论
本试验参考了有关文献[7-9]，对提取方法、提取溶剂、提取时间分别作单因素考察，最终确定了供试品溶液的制备方法为甲醇回流提取法。通过对三种成分的甲醇溶液进行全波长扫描，结果槲皮素、山柰素在254 nm、360 nm处有最大吸收，但鬼臼毒素的最大吸收波长为290 nm，考虑到槲皮素和山柰素的响应值偏高，且鬼臼毒素在其他两个波长下吸收值均不理想，故选择290 nm为检测波长，实验表明该波长检测灵敏度高，杂质吸收峰少，干扰小，效果理想。
本研究建立了八角莲中三个主要化学成分的高效液相色谱定量分析方法。该方法专属性强，精密度、稳定性和重现性好，可为八角莲质量标准的研究及种质资源评价建立基础。
从12批不同产地的样品测定结果可以看出，各地八角莲三个成分含量存在较大差异。其中，湖北、江西、安徽等地的八角莲样品鬼臼毒素含量明显高于云南、四川等地。影响药材品质的因素很多，主要有产地、采收期、加工方法等。本文收集的样品有限，一定程度上影响了研究的深度，后续将扩大样本量，并對其他影响因素与含量间的相关性开展更深入研究。
参考文献：
[1]中国科学院编辑委员会中国植物志[M].北京：科学出版社，2001：254
[2]陈毓亨我国鬼臼类植物资源的研究[J].药学学报，1979，14(2)：101-107
[3]张艳君，冯川八角莲活性成分鉴别及其抗癌活性研究[J].吉林医药学院学报，2013，34(4)：241
[4]姜飞，田海妍，张建龙，等八角莲的化学成分研究[J].中草药，2011，42(4)：634
[5]谭小明，余丽莹，周雅琴濒危药用植物八角莲内生真菌分离鉴定及抗菌活性研[J].中国药学杂志，2014，49(5)：363
[6]张培楠，李朝峰，赵长琦鬼臼毒素及其衍生物[J].天然产物研究与开发，2004，16(1)：80
[7]雷震，杨光义，叶方，等UPLC法测定八角莲药材中鬼臼毒素的含量[J].中国药师，2013，16(4)：548
[8]白吉庆，王小平，孙涛，等高效液相色谱法测定窝儿七中槲皮素、鬼臼毒素、山柰素[J].中国药学杂志，2012，47(1)：69
[9]马志刚，郑永雯，冯益青，等八角莲不同部位鬼臼毒素和4’-去甲鬼臼毒素含量的测定[J].云南民族大学学报：自然科学版，2014，23(5)：317, 百拇医药(徐怡 邱斌 熊永兴 苏钛 李云)
27样品测定取12批样品按上述供试品制备方法制备，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，按上述“21”项色谱条件测定，记录峰面积，以外标法计算样品中槲皮素、鬼臼毒素、山柰素的含量，结果见表2。
3讨论
本试验参考了有关文献[7-9]，对提取方法、提取溶剂、提取时间分别作单因素考察，最终确定了供试品溶液的制备方法为甲醇回流提取法。通过对三种成分的甲醇溶液进行全波长扫描，结果槲皮素、山柰素在254 nm、360 nm处有最大吸收，但鬼臼毒素的最大吸收波长为290 nm，考虑到槲皮素和山柰素的响应值偏高，且鬼臼毒素在其他两个波长下吸收值均不理想，故选择290 nm为检测波长，实验表明该波长检测灵敏度高，杂质吸收峰少，干扰小，效果理想。
本研究建立了八角莲中三个主要化学成分的高效液相色谱定量分析方法。该方法专属性强，精密度、稳定性和重现性好，可为八角莲质量标准的研究及种质资源评价建立基础。
从12批不同产地的样品测定结果可以看出，各地八角莲三个成分含量存在较大差异。其中，湖北、江西、安徽等地的八角莲样品鬼臼毒素含量明显高于云南、四川等地。影响药材品质的因素很多，主要有产地、采收期、加工方法等。本文收集的样品有限，一定程度上影响了研究的深度，后续将扩大样本量，并對其他影响因素与含量间的相关性开展更深入研究。
参考文献：
[1]中国科学院编辑委员会中国植物志[M].北京：科学出版社，2001：254
[2]陈毓亨我国鬼臼类植物资源的研究[J].药学学报，1979，14(2)：101-107
[3]张艳君，冯川八角莲活性成分鉴别及其抗癌活性研究[J].吉林医药学院学报，2013，34(4)：241
[4]姜飞，田海妍，张建龙，等八角莲的化学成分研究[J].中草药，2011，42(4)：634
[5]谭小明，余丽莹，周雅琴濒危药用植物八角莲内生真菌分离鉴定及抗菌活性研[J].中国药学杂志，2014，49(5)：363
[6]张培楠，李朝峰，赵长琦鬼臼毒素及其衍生物[J].天然产物研究与开发，2004，16(1)：80
[7]雷震，杨光义，叶方，等UPLC法测定八角莲药材中鬼臼毒素的含量[J].中国药师，2013，16(4)：548
[8]白吉庆，王小平，孙涛，等高效液相色谱法测定窝儿七中槲皮素、鬼臼毒素、山柰素[J].中国药学杂志，2012，47(1)：69
[9]马志刚，郑永雯，冯益青，等八角莲不同部位鬼臼毒素和4’-去甲鬼臼毒素含量的测定[J].云南民族大学学报：自然科学版，2014，23(5)：317, 百拇医药(徐怡 邱斌 熊永兴 苏钛 李云)
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