高绿补血胶囊对大鼠血液指标及骨髓细胞影响的研究(1)
摘要：目的 观察高绿补血胶囊对大鼠血常规、血生化、骨髓细胞的影响。方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、高绿补血胶囊初始、治疗、负荷剂量组。观察不同剂量高绿补血胶囊对大鼠血液指标及骨髓细胞的影响。结果 高绿补血胶囊治疗剂量组AST/ALT下降(P<0.05)，高绿补血胶囊治疗剂量及负荷剂量均能够上调大鼠白细胞水平(P<0.05)。高绿补血膠囊能促进骨髓细胞的增殖及铁元素的吸收。结论 高绿补血胶囊能一定程度提高大鼠的造血功能及免疫力，且不对大鼠肝肾功能产生损伤。
关键词：类风湿关节炎合并贫血;高绿补血胶囊
中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：1007-2349(2019)07-0059-04
【Abstract】Objective： To observe the effect of Gaolu Buxue Capsule on blood routine， blood biochemistry and bone marrow cells in rats. Methods： Wistar rats were randomly divided into a normal group， Gaolu Buxue capsule groups with initial， treatment and loading-dose to observe the effects of different doses of Gaolu Buxue Capsule on blood parameters and bone marrow cells in rats. Results： The AST/ALT in the treatment group of Gaolu Buxue Capsule decreased (P<0.05). The treatment dose and loading dose of Gaolu Buxue Capsule could up-regulate the white blood cell level of rats (P<0.05). Gaolu Buxue Capsule could promote the proliferation of bone marrow cells and the absorption of iron element. Conclusion： Gaolu Buxue Capsule can improve the hematopoietic function and immunity of rats to a certain extent， and does not damage the liver and kidney function of rats.
【Key words】rheumatoid arthritis combined with anemia， Gaolu Buxue Capsule
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种主要累及关节的自身免疫性疾病，常有其他系统和重要脏器受累，贫血(Anemia)是RA最常见的关节外表现之一[1]，其发病机制中铁代谢紊乱[2-3]和相关细胞因子[4-5]占了关键的因素。现研究高绿补血胶囊对血常规、血生化、骨髓细胞的影响，以大鼠为动物模型，检测血常规及血生化的表达并观测骨髓细胞形态及骨髓内外铁等实验室指标，探讨高绿补血胶囊的药理特性，明确其治疗的作用靶点及方向，为中医药防治RA合并贫血[6-7]的安全合理用药提供可靠的理论和依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物和药品 选取SPF级Wistar雌性大鼠48只，8周龄，体重(200±20)g，健康，由昆明楚商科技有限公司提供。
高绿补血胶囊，300 mg/粒，由专利负责人许东云提供配方，昆明市医学科学研究所浓缩制备为高绿补血胶囊汤剂。
1.2 药物剂量的确立 高绿补血胶囊规格为300 mg/粒，成人服用剂量为2 粒/次，日2 次，共1200 mg·d-1 。按照人与动物药物剂量的换算方法，采取体表面积折算方法计算，换算剂量为24 mg·d-1，按大鼠体重200 g/只计算，则治疗剂量组为120 mg·kg-1·d-1，按照药理研究要求，取1/3 治疗剂量为初始剂量，即40 mg·kg-1·d-1，取3倍治疗剂量为负荷剂量，即480 mg·kg-1·d-1。
1.3 实验设计
1.3.1 药物干预及取材 48只大鼠随机分成4组，A组：正常对照组;B组：高级补血胶囊初始剂量组;C组：高级补血胶囊治疗剂量组;D组：高级补血胶囊负荷剂量组。除正常对照组外分别每天等体积不同浓度梯度高绿补血胶囊溶液灌胃。给药疗程：参照药理研究要求，实验的总给药时间定为21 d，大鼠灌胃容量定为1.0 mL/只。连续21 d灌胃结束后24h内心脏取抗凝血标本约2 mL送检，颈椎脱臼处死，分离出股骨骨髓行普鲁士染色、瑞氏染色后显微镜下拍照。
1.3.2 大鼠血常规、血生化的测量 心脏取抗凝血标本约2 mL，应用血常规分析仪和血生化分析仪进行大鼠血常规、肝肾功测定。
1.3.3 骨髓细胞内、外铁染色观察 剪断股骨两端，用空注射器(抽取一定量的空气)打出骨髓液，迅速推片，晾干。骨髓普鲁士染色采用索莱宝 G1422普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)进行。 固定、染色、脱水透明、中性树胶封片后显微镜下观察拍照。
结果判定：含铁血黄素或三价铁被染成蓝色;细胞核、其他组织被染成红色。
1.3.4 骨髓细胞形态观察 剪断股骨两端，用空注射器(抽取一定量的空气)打出骨髓液，迅速推片，晾干。骨髓瑞氏染色采用索莱宝 G1040瑞氏染液进行。固定、染色、脱水透明、中性树胶封片后显微镜下观察拍照。, 百拇医药(王红明 俸一然 许东云)
关键词：类风湿关节炎合并贫血;高绿补血胶囊
中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：1007-2349(2019)07-0059-04
【Abstract】Objective： To observe the effect of Gaolu Buxue Capsule on blood routine， blood biochemistry and bone marrow cells in rats. Methods： Wistar rats were randomly divided into a normal group， Gaolu Buxue capsule groups with initial， treatment and loading-dose to observe the effects of different doses of Gaolu Buxue Capsule on blood parameters and bone marrow cells in rats. Results： The AST/ALT in the treatment group of Gaolu Buxue Capsule decreased (P<0.05). The treatment dose and loading dose of Gaolu Buxue Capsule could up-regulate the white blood cell level of rats (P<0.05). Gaolu Buxue Capsule could promote the proliferation of bone marrow cells and the absorption of iron element. Conclusion： Gaolu Buxue Capsule can improve the hematopoietic function and immunity of rats to a certain extent， and does not damage the liver and kidney function of rats.
【Key words】rheumatoid arthritis combined with anemia， Gaolu Buxue Capsule
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种主要累及关节的自身免疫性疾病，常有其他系统和重要脏器受累，贫血(Anemia)是RA最常见的关节外表现之一[1]，其发病机制中铁代谢紊乱[2-3]和相关细胞因子[4-5]占了关键的因素。现研究高绿补血胶囊对血常规、血生化、骨髓细胞的影响，以大鼠为动物模型，检测血常规及血生化的表达并观测骨髓细胞形态及骨髓内外铁等实验室指标，探讨高绿补血胶囊的药理特性，明确其治疗的作用靶点及方向，为中医药防治RA合并贫血[6-7]的安全合理用药提供可靠的理论和依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物和药品 选取SPF级Wistar雌性大鼠48只，8周龄，体重(200±20)g，健康，由昆明楚商科技有限公司提供。
高绿补血胶囊，300 mg/粒，由专利负责人许东云提供配方，昆明市医学科学研究所浓缩制备为高绿补血胶囊汤剂。
1.2 药物剂量的确立 高绿补血胶囊规格为300 mg/粒，成人服用剂量为2 粒/次，日2 次，共1200 mg·d-1 。按照人与动物药物剂量的换算方法，采取体表面积折算方法计算，换算剂量为24 mg·d-1，按大鼠体重200 g/只计算，则治疗剂量组为120 mg·kg-1·d-1，按照药理研究要求，取1/3 治疗剂量为初始剂量，即40 mg·kg-1·d-1，取3倍治疗剂量为负荷剂量，即480 mg·kg-1·d-1。
1.3 实验设计
1.3.1 药物干预及取材 48只大鼠随机分成4组，A组：正常对照组;B组：高级补血胶囊初始剂量组;C组：高级补血胶囊治疗剂量组;D组：高级补血胶囊负荷剂量组。除正常对照组外分别每天等体积不同浓度梯度高绿补血胶囊溶液灌胃。给药疗程：参照药理研究要求，实验的总给药时间定为21 d，大鼠灌胃容量定为1.0 mL/只。连续21 d灌胃结束后24h内心脏取抗凝血标本约2 mL送检，颈椎脱臼处死，分离出股骨骨髓行普鲁士染色、瑞氏染色后显微镜下拍照。
1.3.2 大鼠血常规、血生化的测量 心脏取抗凝血标本约2 mL，应用血常规分析仪和血生化分析仪进行大鼠血常规、肝肾功测定。
1.3.3 骨髓细胞内、外铁染色观察 剪断股骨两端，用空注射器(抽取一定量的空气)打出骨髓液，迅速推片，晾干。骨髓普鲁士染色采用索莱宝 G1422普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)进行。 固定、染色、脱水透明、中性树胶封片后显微镜下观察拍照。
结果判定：含铁血黄素或三价铁被染成蓝色;细胞核、其他组织被染成红色。
1.3.4 骨髓细胞形态观察 剪断股骨两端，用空注射器(抽取一定量的空气)打出骨髓液，迅速推片，晾干。骨髓瑞氏染色采用索莱宝 G1040瑞氏染液进行。固定、染色、脱水透明、中性树胶封片后显微镜下观察拍照。, 百拇医药(王红明 俸一然 许东云)