李 娟，高园园，黄 洁，杨晓旭，赵芳芳，俞 洋，5△

    (1.宁夏医科大学中医学院，宁夏 银川 750004；2.宁夏医科大学，宁夏 银川 750004；3.宁夏回族自治区中西医结合医院，宁夏 银川 750021；4.银川国龙医院，宁夏 银川 750004；5.宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室，宁夏 银川 750004)

    年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration，AMD)是引起西方国家50岁以上老年人低视力和盲的首要原因[1]。在我国随着生活水平的提高，AMD发病率也呈逐年上升趋势。RPE光损伤可能是视网膜光损伤的关键，AMD与RPE细胞光损伤密切相关[2]。前期研究显示：枸杞子对RPE细胞具有一定的保护作用[3-4]，枸杞子作为中国传统的药食同源食物，其富含枸杞多糖、多种氨基酸、甜菜碱、微量元素、维生素、生物碱、脂肪酸等化学成分，其中，枸杞多糖(LBP)作为枸杞子主要的有效成分，由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等单糖成分组成，具有诸多重要的生理功能。目前受提取工艺的影响，导致成品枸杞多糖的纯度不一，为研究此种差异对视网膜光损伤保护的影响，本实验选取纯度为50%、65%的LBP，以人RPE为研究对象，观察LBP对光诱导人RPE细胞凋亡的影响，探讨不同纯度枸杞多糖对人RPE细胞光损伤保护的作用机制，提高枸杞多糖在临床应用的利用率。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)，购于BNCC。

    1.2 主要试剂与药物 50%、65%纯度LBP(北京索莱宝生物有限公司)；胎牛血清(美国Gibco公司)；DMEM/F12(美国 HyClone 公司)；青霉素-链霉素混合液、胰蛋白酶(北京索莱宝生物科技有限公司)；磷酸盐缓冲液(美国HyClone 公司)；CCK8 检测试剂盒(上海贝博生物科技有限公司)；AnnexinV-FITC 细胞凋亡检测试剂盒(上海贝博生物科技有限公司)；BCA 蛋白定量试剂盒、全蛋白提取试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司)；Bcl2 Antibody(美国Proteintech公司，货号12789-1-AP)；Bax Antibody(美国Proteintech公司 ......