多发性骨髓瘤细胞株ARH-77L1逆转录酶基因的克隆及体外表达研究
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江元山 石奕武 罗赛群 汤立军 田菁燕 胡维新 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心中国
【摘要】通过菌落原位分子杂交,从多发性骨髓瘤细胞株ARH-77cDNA文库获得L1逆转录酶基因5'端序列.随后使用3'RACE技术,获得L1逆转录酶基因3'端序列及poly(A)尾.生物信息学分析表明:该L1逆转录酶DNA序列有一长552bp开放性阅读框,编码184个氨基酸残基的多肽链,其相对分子质量约为21kDa.同时将编码L1逆转录酶保守区的开放性阅读框DNA片段与原核表达载体pQE30连接,得到重组原核表达质粒,利用大肠杆菌表达并获得L1逆转录酶融合蛋白.
【关键词】 多发性骨髓瘤 ARH- L逆转录酶 基因克隆 体外表达
【基金】国家自然科学基金资助项目(39880021) 国家自然科学基金资助项目(30270570) 国家自然科学基金资助项目(30300406)
【分类号】R733.3
合酶.分析表明,L1样元件比任何LT R型逆转座子更接近Ⅱ型内含子和细菌retron犤1犦.L1样元件的独特性在于其3'末端有一个poly(A)延伸序列,因而认为它是加工后假基因形式.自从发现血友病A、肌营养不良和colon病与人类L1逆转座子的插入有关后,L1样元件在医学上的重要性得到重视犤
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摘 要：通过菌落原位分子杂交，从多发性骨髓瘤细胞株ARH—77 cDNA文库获得L1逆转录酶基因5`端序列.随后使用3，RACR技术，获得L1逆转录酶基因3，端序列及polv(A)尾.生物信息学分析表明：该L1逆转录酶DNA序列有一长552bP开放性阅读框，编码184个氨基酸残基的多肽链，其相对分子质量约为21 kDa.同时将编码L1逆转录酶保守区的开放性阅读框DNA片段与原核表达载体PQE30连接，得到重组原核表达质粒，利用大肠杆菌表达并获得L1逆转录酶融合蛋白.
关键词：多发性骨髓瘤；ARH—77；L1逆转录酶：基因克隆：体外表达
中图分类号：Q786
文献标识码：A
文章编号：1007—7847(2005)02—0118—06
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