无饲养层培养人胚胎干细胞方法的建立
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赵明 任彩萍 蒋星军 杨旭宇 张宏波 单文姣 周亮 冯湘玲 中南大学肿瘤研究所 中南大学肿瘤研究所 中南大学湘雅医院神经外科 中南大学肿瘤研究所 中南大学肿瘤研究所 中南大学肿瘤研究所 中南大学肿瘤研究所 中南大学肿瘤研究所
【摘要】人胚胎干细胞(humanembryonicstemcell,hES细胞)是当前医学研究的热点之一.然而hES细胞培养条件苛刻,通常需要采用鼠胚胎成纤维细胞(mouseembryonicfibroblast,MEFs)饲养层来维持其未分化状态,成为目前hES细胞研究的瓶颈之一.本实验成功地将hES细胞接种在细胞外基质包被的六孔板上培养,传代20次后细胞仍然保持良好的未分化状态,各种hES细胞生物学特性(如表面标志物SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81,OCT-4,碱性磷酸酶及体内外分化潜能等)均无改变;其冻存、复苏效果与生长在饲养层上的hES细胞无明显差异.因此,该无饲
【关键词】 人胚胎干细胞 无饲养层培养体系 基因转染
【基金】国家自然科学基金资助项目(30200140)
【分类号】Q813.1
人胚胎干细胞(hum an em bryonic stem cell,hE S细胞)是由植入前早期胚胎内细胞团(innercell m ass,IC M)或胚胎原始生殖细胞(prim ordialgerm cells,PG C s)分离得到并能在体外长期培养的高度未分化全能细胞系.hE S细胞具有分化成内、中、外3个胚层所有类型细胞的能力.开展h
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摘 要：人胚胎干细胞(hunlanenlbl3,omcstemcell，hES细胞)是当前医学研究的热点之一.然而hES细胞培养条件苛刻，通常需要采用鼠胚胎成纤维细胞(1llOUSeembryonic fibroblast，MEFs)饲养层来维持其未分化状态，成为目前hES细胞研究的瓶颈之一.本实验成功地将hKS细胞接种在细胞外基质包被的六孔板上培养，传代20次后细胞仍然保持良好的未分化状态，各种hES细胞生物学特性(如表面标志物SSEA-3、SSEA—4、TRA—1—60和TRA—1—81。OCr—4，碱性磷酸酶及体内外分化潜能等)均无改变；其冻存、复苏效果与生长在饲养层上的hES细胞无明显差异.因此，该无饲养层培养体系可以用于培养hES细胞，并为hES细胞转基因研究及大规模培养打下良好的基础.
关键词：人胚胎干细胞；无饲养层培养体系；基因转染
中图分类号：Q813.1+1
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2005)02—0134—05
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