人VEGF基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
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周文武 胡建国 马燕琳 林玲 杨进福 唐滔 中南大学湘雅二医院心胸外科 中南大学湘雅二医院心胸外科 海南医学院 中南大学湘雅三医院 中南大学湘雅二医院心胸外科 中南大学湘雅二医院心胸外科
【摘要】为建立hVEGF165基因转染大鼠间充质干细胞的方法.采用密度梯度离心-贴壁培养法获Wistar大鼠BMMSC,并测定其生长曲线和表面标志CD34、CD44、CD45及SH3,然后向成骨细胞及脂肪细胞诱导分化;用脂质体介导pcDNA3.1-hVEGF165转染BMMSC,观察转染后细胞形态和生长情况的变化,通过RT-PCR、Western和ELISA鉴定VEGF在细胞中的表达情况.经培养的大鼠BMMSC,CD44、SH3检测为阳性,CD45、CD34阴性,可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞;经RT-PCR、Western和ELISA检测证实阳离子脂质体能成功地将hVEGF165基因转染至大鼠BMM
【关键词】 骨髓 间充质干细胞 VEGF 转染
【基金】湖南省科技基金项目(03TCY2012)
【分类号】R329
Fridenstein最早证实了骨髓间充质干细胞(Bone M arrow M esenchym alStem Cell,BM M SC)的存在[1].BM M SC可向骨细胞、脂肪细胞、神经细胞、肌细胞和内皮细胞等各种细胞系转化,还具有取材方便、体外扩增容易、易于基因操作、适合自体移植的特点,被认为是缺血性心脏病的细胞
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摘 要：为建立hVECF165基因转染大鼠间充质干细胞的方法。采用密度梯度离心—贴壁培养法获Wistar大鼠BMMSC，并测定其生长曲线和表面标志CD34、CD44、CD45及SH3，然后向成骨细胞及脂肪细胞诱导分化；用脂质体介导pcDNA3.1-hVECF165转染BMMSC，观察转染后细胞形态和生长情况的变化，通过RT-PCR、Western和ELISA鉴定VEGF在细胞中的表达情况。 经培养的大鼠BMMSC，CD44、SH3检测为阳性，CD45、CD34阴性，可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞；经RT-PCR、Western和ELISA检测证实阳离子脂质体能成功地将hVEGF165基因转染至大鼠BMMSC中，并获得有效的表达.真核表达载体pcDNA3.1-hVECF165在BMMSC中获有效表达，为VEGF基因转染BMMSC移植对心梗后大鼠心功能及心室重构的影响提供了实验依据。
关键词：骨髓；间充质子细胞；VECF；转染
中图分类号：Q132.3
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2005)04—0301—07
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