Heka细胞导入TRIM45基因后的比较蛋白质组学研究(1)
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摘 要：为了确定TRIM45基因的功能和作用机理，将其转入Hela细胞，分析细胞内蛋白质表达水平的变化。研究采用双向凝胶电泳的方法分别对转入pCMV-Tag2B空载体和重组质粒pCMV-Tag2B-TRIM45的Hela细胞全蛋白进行分离，利用PDQUEST7.2软件分析，鉴定得到15个差异点，包括8个上调点和7个下调点。为进一步研究TRlM45基因的功能奠定了良好的基础。
关键词：Hela细胞系；蛋白质组学；双向凝胶电泳；质谱
中图分类号：Q297；Q51
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2006)02-0103-06
蛋白质组学是后基因组时代蓬勃发展的技术体系，其特点是采用高通量、高分辨率的蛋白质鉴定技术，全景式的研究在特定条件下的蛋白质表达谱，并由此在蛋白质水平上获得对组织发育、疾病发生、细胞代谢等过程整体而全面的认识。高分辨率的蛋白质双向凝胶电泳(tWO-dimentionalelectrophoresis，2DE)和高灵敏度质谱(Massspec-trometry，MS)技术相结合，是蛋白质水平研究的强有力武器。
RBCC/TRIM蛋白参与细胞增殖、细胞分化、个体发育、肿瘤发生、细胞凋亡等多种生理途径，还与多种疾病的发生相关。人TRIM45编码一个新的RBCC/TRIM家族蛋白，本研究小组早期实验发现它可以抑制Elk-1和AP-1蛋白转录活性，提示它可能与肿瘤发生有关。在对TRIM45功能和作用机制不了解的情况下，本文从蛋白质组学方法人手对该基因进行研究。因为Hela细胞为人宫颈癌细胞系，采用此细胞系能更真实反映TRIM45在人体内的功能。我们分别收集获得稳定转染空载体pCMV-Tag2B和重组质粒pCMV-Tag2B-TRIM45的Hela细胞 ......
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