结核杆菌Ag85B基因疫苗的免疫保护效果研究(2)
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将匀浆液按一定比例稀释后,接种改良罗氏培养基(1-J培养基),37℃孵箱中培养4—8周后,进行结核杆菌菌落计数。右肺和脾组织的剩余部分进行固定、石蜡包埋切片,苏木素-伊红(HE)染色,镜检观察组织病理改变,同时进行抗酸染色。
1.2.6 统计学分析
利用SPSSl0.0统计分析软件,采用‘检验进行组与组之间的分析
2 结果
2.1 免疫小鼠脾细胞分泌细胞因子(IFN-y、Il-2、IL-4)的测定(表1)
2.2免疫小鼠脾细胞Ag85B基因特异性CTL活性的测定
按公式计算细胞毒性百分率,细胞毒性百分率(%)=[实验组A值-靶细胞自发性释放组A值]/(靶细胞最大释放组A值-靶细胞自发性释放组A值)]×100%.结果显示,效靶比为100:l、50:1、10:1时,结核杆菌Ag85B基因疫苗组的细胞毒。性百分率分别为55.3%、35.7%、9.2%,BCG组的细胞毒性百分率分别为28.9%、21.4%、9.8%,结核杆菌Ag85B基因疫苗组的细胞毒性百分率高于BCG免疫组、pcDNA3.1(+)阴性对照组和PBS空白对照组(p
2.3 C57BL/6小鼠肺和脾组织涂片结果
尾静脉注射结核杆菌H37Rv国际标准强毒株4周后,处死动物,肺和脾组织匀浆涂片,Z-N染色查抗酸杆菌,结果(表2)
2.4 C57BL小鼠肺和脾组织培养菌落计数
尾静脉注静射结核杆菌H37Rv国际标准强毒株4周后 ......
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