甾醇生物合成中的关键酶—环氧角鲨烯环化酶的分子生物学研究(2)
 |
| 第5页 |
 |
| 第1页 |
参见附件(675KB，6页)。
式在亚族内高度保守，在整个OSCs基因家族中也很保守。
氨基酸序列同源性比较发现，环阿屯醇合成酶类氨基酸序列的相似性达到80%，三萜合成酶类具有70%的相似性，与环阿屯醇合成酶间的相似性也达到60%，所有OSCs酶的氨基酸序列中都存在DCTAE和QW高度保守区域。
有些三萜合成酶是高度特异性的，如人参卢一香树素合成酶(βAS)和豌豆羽扇豆合成酶(LUS)，而有些则是多功能的，如PSM(豌豆)和IUP1(拟南芥)，PSM的催化产物中β-，香树素和α-香树素的量几乎相等，LUP1催化产物中羽扇豆醇占了绝大部分，β-，香树素只占了少量，另一豌豆β-，香树素合成酶PSY的氨基酸序列与PSM具有78%的同源性，但催化产物却截然不同，β-香树素是PSY催化产生的唯一产物，将PSM的氨基酸序列与已知的3种β-香树素合成酶序列比较发现，PSM中的一些氨基酸序列没有其他3个酶对应部位那样保守，如Leu257被Trp替换，Gln代替Met285，Thr代替Val331，Arg代替His337，而这些部位已被证实与产物类型分化有关，是否由于脂肪族Leu代替芳香族Trp后导致C19的π正离子不稳定，而更有利于在C20处产生更稳定的三级正离子，导致α-香树素的生成，这还有待点突变试验的进一步证实，拟南芥ATLUP2也是一种多功能蛋白，可以催化合成β-香树素和α-香树素(85%)和羽扇豆醇(15%)三种产物，实验表明由人参β-香树素合成酶cDNA的N末端和羽扇豆醇合成酶cDNA的C末端构成嵌合体在酵母中表达，产物中出现β-香树素和羽扇豆醇(3：1)两种三萜，这种一酶多产物现象说明环化过程中有些步骤酶控不严谨，
3 环氧角鲨烯环化酶(OSCs)基因的表达调控
运用OSCs的不可逆抑制剂和OSCs突变分析发现，高度保守序列DCTAE与底物结合有关，将SCs的DDTAV定点突变成DCTAE，结果导致该酶底物由角鲨烯变成2，3-环氧角鲨烯，IkureAbe and Glenn D.Prestwich(1994)用CNBr降解3H29-MOS标记的小鼠肝OSCs获得一段6 kD高度保守的放射性肽段 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(675KB，6页)。