苎麻不同组织总RNA的有效分离(1)
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摘 要:从植物组织中提取总RNA是进行植物分子生物学某些方面研究的必要前提,通过选用5种不同的试剂,我们找到一种新的RNAplant分离试剂,可以很有效的提取苎麻叶、茎皮、雌花、果的RNA,且质量很好,可以进行cDNA的合成和RT-PCR等下游实验,并对不同试剂提取和多糖、多酚的去除进行了讨论.
关键词:苎麻:RNA;提取:
中图分类号:Q331
文献标识码:A
文章编号:1007-7847(2007)01.0021.04
从植物组织中提取总RNA是进行植物分子生物学某些方面研究的必要前提,如进行Northom杂交分析,纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学实验,都需要高质量的总RNA,目前常用于植物材料RNA提取的方法有胍法、热硼酸法,CTAB法、SDS法等,这些方法对于提取某些植物的总RNA是有效的,但对另外一些植物来说,却并不一定是好的方法,因为不同植物组织的细胞内外成分复杂多变,在使用某些方法提取RNA时会起干扰作用,如LiC1沉淀,或造成RNA的降解、丢失,或得到的RNA样品含杂质较多而干扰以后的分析研究工作,或者根本得不到RNA,原因是某些植物的组成成分和结构特点不同造成的,在结构上,一些植物具有更为坚硬的细胞壁,除了含有蛋白质、多糖等杂质外,同时含有更多的多酚化合物、木质素、纤维等物质,这些因素决定了这些植物组织RNA提取技术上的特殊性,苎麻(Boehmeria nivea(L.)Gaud)是荨麻目(Urticales)荨麻科(Urticaceae)苎麻属(Bochmeria)的多年生草本植物,起源于中国,苎麻主要以收获纤维为目的来栽培 ......
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