SKF-96365对SD大鼠急性分离下丘脑神经元温度敏感性的影响
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摘 要:采用电流钳技术观察SD大鼠急性分离下丘脑神经元的自发性放电及其温度敏感特性,显微镜下,急性分离神经元表现为两种形态,一种具有突起,另一种表现为无突起的形态,记录到的有突起的78例神经元中,可以记录到4例热敏神经元(wsn),但在无突起的61例神经元没有观察到热敏神经元的存在,在浴槽液体中加入SKF96365,这些热敏神经元就会失去温度敏感性,以上结果表明pWSN可能通过突起部位上分布的TRPV4而起到对周围环境温度的感受作用。
关键词:热敏神经元:TRP;温度
中图分类号:Q42
文献标识码:A
文章编号:1007-7847(2007)01-0025-03
在外界环境温度变化时,下丘脑神经元通过调整放电率来维持机体内环境的稳态,根据神经元对外界环境刺激的放电反应将其区分为如体温敏感和不敏感神经元等类型,在温度升高时放电率增加不低于0.8impulse/(s·℃)的神经元称为热敏神经元,但目前对下丘脑神经元的温度敏感机制尚不完全,文献报道在皮肤和外周神经元对温度信号的感受过程中,TRP蛋白都起着关键的作用,温度可以激活TRP通道,出现外向整流的电流成分,但TRP离子通道蛋白是否参与下丘脑视前区和下丘脑前部(POAH)的温度感受功能,目前存在较多的争论,甚至出现针锋相对的争论,Martin M等在研究中证实神经元的纤维联系网上有TRPV4的存在,本文通过观察采用TRPV通道的阻断剂SKF-96365对温度变化时急性分离的下丘脑神经元放电率的影响,试图揭示TRP通道是否参与热敏神经元的温度敏感机制的形成。
1 材料和方法
1.1 下丘脑脑片制作和神经元急性分离
取出生后(17±2)d的SD大鼠,快速断头去脑,分离出下丘脑,迅速置于0℃的高浓度蔗糖液中,用振动切片机 (World Precision InstrumentsMA752)切割成400μm厚的脑片,在HBSS(Sigma)液中漂洗3次后置于95%O2和5%CO2饱和的EBSS(Sigma)液中孵育1h ......
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