2x10/mL的浓度接种6孔板中续养，待细胞生长至90%-95%满，备用，STNFR1-MBP 40mg/L与10μ/L的TNF-α4℃反应2h，再加入QSG7701细胞培基中，并加入1mg/L放线菌素D；设MBP为对照组(加MBP、TNF-a和放线菌素D)以及正常组(只有QSG7701细胞，不加TNF-α和放线菌素D)，每组设3个复孔，在37℃，5%CO₂及饱和湿度条件下，培养6h收集细胞。

    2)Anexin-V-FITC染色：a)将待测细胞用0.25%胰酶消化，制成单个悬液，调整细胞密度为0.5～1×10₆/L；b1取1 mL细胞，1000r/min 4℃离心10min；c)加入1mL冷的PBS，轻轻振荡使细胞悬浮；d)1000r/min 4℃离心10 min，弃上清液；e)重复步骤c)、d)两次；f)用去离子水按1：4稀释结合缓冲液，将细胞重悬于250μL结合缓冲液，并使其浓度为lx10₆/L；g)取100μL的细胞悬液于5mL流式管中，加入μL Annexin-V-FITC和10μ20mg/L的PI，轻轻混匀 ......