含钙离子载体(5μmol/L)的PBS缓冲液中保温，10min后条件[生缓冲液陕复，用于二十烷类的测定。

    1.6 数据分析

    细胞生存力(MTT)和二十烷类(前列腺素E₂)水平的数据比较采用Student's t-test，所有分析都是每组6孔细胞，并且每一部分实验重复3次，显著性界限值为p<0.05。

    2 结果

    2.1 携带fat-1基因的重组腺病毒载体的构建质粒fat-1cDNA经EcoR V/Kpn I切割后，插入到pAdTrack-CMV载体中，并与腺病毒骨架载体pAdEasy 1进行同源重组，得到重组的腺病毒Ad.GFP.fat1，携带2个基因fat-1和GFP(图1所示为其图谱)，另外还得到克隆Ad.GFP(只携带绿荧光蛋白基因GFP，作为报告基因)，用作对照病毒，重组腺病毒载体DNA用Pac I和BamH I消化，序列测定进行鉴定，结果都表明该重组载体的结构是正确的(图2)。

    2.2 大鼠皮质神经元中fat-1基因的表达

    转染Ad.GFP.fatl后表达fat-1基因的大鼠皮质神经元细胞，在同时表达GFP后很容易在荧光显微镜下辨别出来(它表现为亮的绿色荧光)，转染48h后，30%～40%的神经元转染成功，并表达GFP基因(图4，a，A)，fat-1基因的表达情况使用核酸酶保护性分析(ribonuclease protection assay)mRNA显示 ......