n-6脂肪酸去饱和酶fat-1基因对神经元细胞凋亡的抑制作用(1)
摘 要:将C.elegans n-6脂肪酸去饱和酶基因fat-1的cDNA插入到腺病毒的穿梭载体pAd-CMV中,并与骨架载体同源重组,构建腺病毒重組载体(Ad.GFP.fat1),通过包装细胞系(293)产生重组腺病毒,感染原代培养的大鼠皮层细胞,在显微镜下观察、细胞增殖试剂盒(MTT)和凋亡染色试剂盒分析fat-1基因对大鼠皮层细胞凋亡的影响,核糖核酸酶保护性分析,检测fat-1基因在大鼠皮层细胞内的表达,酶联免疫分析花生四烯酸类(Eicosanoids)前列腺素(ProstaRlandin E2)的含量,结果表明,通过基因重组技术,得到预期的重组病毒;fat-1基因在原代培养的大鼠皮层细胞中能有效异源表达,2d后,可检测到fat-1mRNA的条带,与对照Ad.GFP细胞相比,fat-1基因明显抑制了大鼠皮层细胞因诱导产生的凋亡(35%),受保护细胞的前列腺素含量也明显地减少(30%)。关键词:神经元细胞;凋亡;多不饱和脂肪酸;基因治疗
中图分类号:Q735;R741.5 文献标识码:A 文章编号:1007-7847(2007)03-0227-06
哺乳动物的大脑富含长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFAS) ......
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