成块。

    1.2.5 pAAV-hrGFP-uPA的产生及鉴定

    接种3×10⁶个AAV-293细胞于100mm培养皿中，加入含10%胎牛血清的DMEM培养基，培养2d细胞达到70%～80%融合时，吸取每个质粒溶液pAAV-hrGFP-uPA质粒、pAAV-RC和pHelper(浓度均为1g/L)各10μg加入到15mL柱状试管中，再加入1mL 0.3mol/L的CaCl²，轻轻混匀，加入1mL 2×HBS于另一柱状试管中，滴加上述1.03mL DNA/CaCl⁴混合物，反复吹打混匀，以点滴方式加入DNA/CaCl²/HBS悬液于AAV-293细胞的培养皿中，旋转均匀分散该DNA悬液，将培养皿放人37℃的培养箱中培养6h，培养结束后，添加10mL新鲜的含10%胎牛血清的DMEM培养基，继续在37℃培养箱中培养72h，培养结束后，收集培养基和细胞于15mL的柱状试管中，经过4次冰冻和解冻(37℃)循环，每次持续10min，然后于室温中离心(10000g)10min，转移上清(初病毒储存液)于另一新的试管中置-80℃保存 ......