人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK肿瘤细胞特异性表达载体的构建(1)
摘 要:将自杀基因TK插入质粒pGL3-hTp和pGL3-Control中,取代其上的荧光素酶基因,分别构建hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-hK和pGL3-SV40-TK,酶切和PCR鉴定结果显示重组质粒pCL3-hTp-TK和pGL3-Sv40-TK构建成功;用脂质体法将pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK瞬时转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤維细胞株MRC-5,RT-PCR显示转染pCL3-SV40-TK的细胞A549和MRC-5均有TK mRNA表达,转染pcL3-hTp-TK的A549细胞中也有TK mRNA表达,但转染pCL3-hTp-rX的MRC-5细胞无TK mRNA表达,提示hTERT启动子可以调控自杀基因HSV-TK(在肺癌细胞中靶向表达,可能是肿瘤靶向性基因治疗中比较理想的转录调控元件。
关键词:肺癌;自杀基因;端粒酶催化亚单位;靶向性表达
中图分类号:R734.2 文献标识码:A 文章编号:1007-7847(2007)03-0273-06
人端粒酶催化亚单位(human telomerasecatalytic subunit ......
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