利用实时荧光定量PCR法检测转基因水稻外源基因拷贝数的研究(2)
对NAsl和SPS这两个基因的熔解曲线分析(图5、图6)可以看出,这两个基因的熔解曲线都是单峰型,说明在PCR扩增过程中,没有出现非特异性扩增,由此推断定量PCR扩增所获得的数据是可靠的。
2.3 NASl和SPS基因起始模板数的计算
在本实验中,选取8株PCR检测为阳性的植株和1株非转基因对照植株,利用SDS法提取基因组DNA,每个样品做3个重复,进行定量PCR反应,获得扩增曲线,荧光域值的设定与制作基因标准曲线时相同,获得待测样品的CC值(表2),并由方程:NAS0=10(-0.279Ct+12.3315)计算出该样品NAS1基因的起始模板数 ......
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