72℃，7min结束反应，以Actl基因的表达作为参照，Actin基因的引物序列为：5′-GGCAAAAGGATGCTFATGTTGG-3′，5′-ATITCACGCTCTGCTGTGGTGG-3′，反应结束后取5μL进行电泳检测，照相。

    PCR阳性的产物纯化后，连接至pMD-19T载体，进行蓝白斑筛选挑取阳性克隆，酶切鉴定后送上海闪晶生物公司进行序列测定。

    2 结果与分析

    2.1 生态型Col-O的TGG6基因的失活突变

    植物芥子酶基因一般都由12个外显子和11个内含子组成，TGG4和JP7GG5代表一个芥子酶基因新家族，其基因由13个外显子和12个内含子组成(待发表)，TGG6基因序列与TGG4和TGG5相似型较高，基因结构也相似，由13个外显子组成，不过，将生态型Col-O的TGG6核基因序列、cDNA序列与TGG4、TGG5基因序列比较发现 ......