受精卵反义寡核苷酸显微注射影响因素的研究(2)
底大概有一个月的产卵期,不过到每天下午或金鱼产卵后期,可能因气温相对较高,卵子质量差,注射的受精卵死亡率高,因此应选择上午的受精卵做注射实验,并使温度控制在20℃左右。
2.2 去膜胰酶浓度对胚胎发育的影响
在其它条件一致的情况下,通过比较不同浓度的去膜效果,发现浓度为0。4%的胰酶比较合适,大约15min可以去膜;浓度低于0.4%的胰酶消化受精卵的膜较困难,需要半小时甚至更久才能去膜,影响单细胞期及时注射,另外,消化时间过久,也会导致胚胎消化过度,卵透明带蓬松,活力下降,降低注射后卵的成活率,而浓度高于0.4%的胰酶容易消化过度,胚胎细胞呈不规则形,影响受精卵的发育。
2.3 注射剂量对胚胎发育的影响
如表2所示 ......
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