RNAi抑制肝星状细胞TIMP-I基因表达及对细胞生物学行为的影响(1)
摘 要:研究了siRNA对大鼠肝星状细胞(CFSC)TIMP-I基因表达及对细胞生物学行为的影响,用RT-PCR方法获得带有T7启动子的TIMP-I全基因序列,体外转录法获得TIMP-1dsRNA,Diccr酶切后得到siRNA,用质脂体将siRNA转染至CFSC,RT-PCR检测TIMP-I mRNA的表达,MTT方法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡,结果成功获得TIMP-I siRNA,将TIMP-I siRNA转染至CP5C 12、24、48 h后,与对照相比,TIMP-I mRNA的表达逐渐下降,经OuanitY Onc(BIO-RAD,USA)分析后,其抑制率分别为49.18%、58.72%和64.73%;siRNA转染CFSC细胞后,CFSC生长受到抑制,细胞凋亡不明显,实验结果表明体外转录法得到的siRNA能有效地降低大鼠CFSC中TIMP-I的表达,明显抑制CFSC的增殖,但不直接引起CFSC的凋亡。关键词:RNAi;基质金属蛋白酶组织抑制因子-1;肝星状细胞;细胞凋亡
中图分类号:R34 文献标识码:A 文章编号:1007-7847(2007)04-0342-06
基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)是近年发现的一种由巨噬细胞和结缔组织细胞产生 ......
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