Lys4突变对敬钊缨毛蛛毒素-V钠通道活性的影响
参见附件(463kb)。
曾雄智 邓梅春 彭莹 魏文廷 王贤纯 梁宋平 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室
【摘要】敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V,JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂,为了深入研究该毒素的结构与功能关系,应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A-JZTX-V,合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相对分子质量的鉴定,用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析.研究结果表明,Lys4被Ala取代后,K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当,提示Lys4与JZTX-V对TTX-S钠通道的抑制活性关系不大;而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍,说明Lys4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基.
【关键词】 敬钊缨毛蛛毒素-V 固相多肽合成 突变体 氧化复性 膜片钳
【基金】国家自然科学基金重点项目(30430170) 面上项目(30670640,30500146) 国家973项目(2006CB708508) 863项目(2006AA02Z141) 湖南省自然科学基金资助项目(07JJ3072,06C503)
【分类号】Q51
敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V,JZTX-V)是从我国新发现的珍稀蜘蛛敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)[1]粗毒中纯化到的一种新型肽类神经毒素.该毒素由29个氨基酸残基组成,其一级结构为YCQKWMWTCDSKRACCEGLRCKLWCRKII,其中6个半胱氨酸按照1-4(Cys2-Cys16)、2-5(Cys9-Cys21
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摘要：敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V，JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂，为了深入研究该毒素的结构与功能关系，应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A—JZTX，V，合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性，复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相对分子质量的鉴定，用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析，研究结果表明，Lys4被Ala取代后，K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当，提示Lys4与JZTX-V对TTX-S钠通道的抑制活性关系不大；而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍，说明Lys4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基。
关键词：敬钊缨毛蛛毒素-V；固相多肽合成；突变体；氧化复性；膜片钳
中图分类号：Q25；Q343
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2008)01-0020-04
Effects Of Lys4 Mutation On S0dium Channels Activity Of JZTX-V
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
曾雄智 邓梅春 彭莹 魏文廷 王贤纯 梁宋平 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室
【摘要】敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V,JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂,为了深入研究该毒素的结构与功能关系,应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A-JZTX-V,合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相对分子质量的鉴定,用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析.研究结果表明,Lys4被Ala取代后,K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当,提示Lys4与JZTX-V对TTX-S钠通道的抑制活性关系不大;而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍,说明Lys4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基.
【关键词】 敬钊缨毛蛛毒素-V 固相多肽合成 突变体 氧化复性 膜片钳
【基金】国家自然科学基金重点项目(30430170) 面上项目(30670640,30500146) 国家973项目(2006CB708508) 863项目(2006AA02Z141) 湖南省自然科学基金资助项目(07JJ3072,06C503)
【分类号】Q51
敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V,JZTX-V)是从我国新发现的珍稀蜘蛛敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)[1]粗毒中纯化到的一种新型肽类神经毒素.该毒素由29个氨基酸残基组成,其一级结构为YCQKWMWTCDSKRACCEGLRCKLWCRKII,其中6个半胱氨酸按照1-4(Cys2-Cys16)、2-5(Cys9-Cys21
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摘要：敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V，JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂，为了深入研究该毒素的结构与功能关系，应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A—JZTX，V，合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性，复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相对分子质量的鉴定，用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析，研究结果表明，Lys4被Ala取代后，K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当，提示Lys4与JZTX-V对TTX-S钠通道的抑制活性关系不大；而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍，说明Lys4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基。
关键词：敬钊缨毛蛛毒素-V；固相多肽合成；突变体；氧化复性；膜片钳
中图分类号：Q25；Q343
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2008)01-0020-04
Effects Of Lys4 Mutation On S0dium Channels Activity Of JZTX-V
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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