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编号:11608263
端粒植入胃癌7901细胞对细胞生长、端粒和端粒酶的影响
http://www.100md.com 2008年3月1日 巩 艳等
端粒酶活性,端粒长度,细胞生长曲线,染色体核型分析,细胞永生化,染色体数目,转染细胞,胃癌细胞,质粒
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    巩艳 房殿春 罗元辉 张汝钢 第三军医大学附属西南医院全军消化病研究所 第三军医大学附属西南医院全军消化病研究所 第三军医大学附属西南医院全军消化病研究所 第三军医大学附属西南医院全军消化病研究所

    【摘要】研究外源端粒片段植入胃癌7901细胞后对细胞生长、端粒长度和端粒酶活性的影响.采用lipofectTM2000介导的转染方式,将含有端粒片段质粒pSXneo-1.6-T2AG3转染胃癌细胞SGC7901,PCR在基因水平上鉴定外源性端粒片段的植入后,采用TRAP法检测转染细胞端粒酶活性变化,TRF法检测转染细胞端粒长度变化,MTT法检测细胞生长曲线,RT-PCR测定转染细胞hTERT表达变化,染色体核型分析细胞染色体变化.结果显示端粒片段成功导入SGC7901细胞后获得稳定的细胞株,端粒片段植入后细胞生长变慢,端粒长度延长不明显,端粒酶活性明显降低,hTERTmRNA表达水平下降,核型分析显示转染前后细胞染色体数目无明显变化.实验成功将携带了1600bp端粒TTAGGG重复序列的真核表达载体pSX-T2AG3-neo稳定转染至人胃癌7901细胞中,端粒植入降低细胞端粒酶的活性和下调端粒酶活性亚单位hTERT的表达,但对端粒长度无明显影响.

    【关键词】 端粒植入 端粒酶活性 端粒长度 细胞生长曲线 染色体核型分析 细胞永生化 染色体数目 转染细胞 胃癌细胞 质粒

    【基金】国家自然科学基金资助项目(30270609)

    【分类号】R735.2

    端粒与肿瘤发生发展的关系是近年来医学研究的热点之一.端粒长度的维持,是细胞永生化和无限制增殖的基础.端粒酶延长端粒长度,已在几种细胞发现端粒能够植入并形成稳定转染体,其间需要端粒酶的作用[1].但是端粒的植入对整个染色体的影响及对端粒酶活性影响还未见报道.由于在
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     摘要:研究外源端粒片段植入胃癌7901细胞后对细胞生长、端粒长度和端粒酶活性的影响,采用lipofectTM2000介导的转染方式,将含有端粒片段质粒pSXneo-1,6-T2AG3转染胃癌细胞SGC790l,PCR在基因水平上鉴定外源性端粒片段的植入后,采用TRAP法检测转染细胞端粒酶活性变化,TRF法检测转染细胞端粒长度变化,MTT法检测细胞生长曲线,RT-PCR测定转染细胞hTERT表达变化,染色体核型分析细胞染色体变化,结果显示端粒片段成功导入SGC7901细胞后获得稳定的细胞株,端粒片段植入后细胞生长变慢,端粒长度延长不明显,端粒酶活性明显降低,hTERTmRNA表达水平下降,核型分析显示转染前后细胞染色体数目无明显变化,实验成功将携带了1600 bp端粒TTAGGG重复序列的真核表达载体pSX-T2AG3-neo稳定转染至人胃癌7901细胞中,端粒植入降低细胞端粒酶的活性和下调端粒酶活性亚单位hTERT的表达,但对端粒长度无明显影响,关键词:端粒植入:端粒酶:端粒长度中图分类号:R394

    文献标识码:A

    文章编号:1007-7847(2008)01-0082-05

    Telomere Seeding to Gastric Cancer Cell Line 7901 and its Effect on Cell Growth,Telomere and Telomerase

    注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文

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