基于IgG检测为模型的玻璃介质定量蛋白质芯片的研制及评价
蛋白质芯片技术,免疫球蛋白G,酶联免疫吸附试验,醛基修饰,人血清白蛋白,两种方法,标准品,标准曲线,定量检测
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费嘉 马文丽 吴清华 郑文岭 南方医科大学基因工程研究所
【摘要】为研制高通量定量检测的蛋白质芯片,以人血清IgG为研究模型,选择戊二醛基修饰的玻片为载体,蛋白质样品溶解于20%甘油的PBS,由机械手将浓度为0.5g/L人IgG单克隆抗体点样在玻片上,人血清白蛋白为阴性对照,以1%的BSA为封闭液对蛋白质芯片进行封闭,并经相应处理,构建用于定量检测人血清IgG蛋白质芯片.先以不同浓度IgG标准品为待测样品,建立蛋白质芯片方法和ELISA方法的标准曲线,两条标准曲线的R2值分别为0.996和0.994(P0.01).两种方法的检测人IgG结果有很好的相关性(R2=0.9937,P0.01),其敏感性均在15.625μg/L.用两种方法分别检测10例人血清IgG,结果显示两种方法的检测的IgG浓度有很好的一致性,以玻片为载体的蛋白质芯片可用于微量生物样品的定量检测.
【关键词】 蛋白质芯片技术 免疫球蛋白G 酶联免疫吸附试验 醛基修饰 人血清白蛋白 两种方法 玻璃介质 标准品 标准曲线 定量检测
【基金】广东省科技计划重点引导项目(2005B33101005) 广州市花都区科技计划项目(05-HDGY-001)
【分类号】Q819
蛋白质是生物功能的执行者,在后基因组时代,蛋白质检测技术的提高对于揭示未知蛋白的功能具有重要意义[1,2].蛋白质的定量检测是当前临床和科研中不可缺少的一项技术,传统的ELISA方法需要的样品较多以及难以同时进行多种蛋白质的分析,而蛋白质芯片技术具有高通量、快速等优点[
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摘要：为研制高通量定量检测的蛋白质芯片，以人血清IgG为研究模型，选择戊二醛基修饰的玻片为载体，蛋白质样品溶解于20%甘油的PBS，由机械手将浓度为0.5g/L人IgG单克隆抗体点样在玻片上，人血清白蛋白为阴性对照。以1%的BSA为封闭液对蛋白质芯片进行封闭，并经相应处理，构建用于定量检测人血清IgG蛋白质芯片。先以不同浓度IgG标准品为待测样品，建立蛋白质芯片方法和ELISA方法的标准曲线，两条标准曲线的R2值分别为0.996和0.994(P<0.01)。两种方法的检测人IgG结果有很好的相关性(R2=0.9937，P<0.01)，其敏感性均在15.625μg/L。用两种方法分别检测10例人血清IgG，结果显示两种方法的检测的IgG浓度有很好的一致性，以玻片为载体的蛋白质芯片可用于微量生物样品的定量检测。
关键词：蛋白质芯片；免疫球蛋白G：酶联免疫吸附试验：醛基修饰
中图分类号：Q819
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2008)02-0154-04
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