人胚胎干细胞在3种培养体系中的生长

http://www.100md.com 2009年3月1日 许慧芳 陈 红 焦淑洁 黎逢光 张苏明

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    许慧芳 陈红 焦淑洁 黎逢光 张苏明 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科;华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科;中国人民解放军161医院神经内科;

    【摘要】人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的培养一直是干细胞研究的重要内容.用本实验室独立建系的两株hESCs,建立3种不同的培养体系:小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)做饲养层,永生化人成纤维细胞(immortalized human adult fibroblasts,HAFi)做饲养层,无饲养层条件培养基培养体系(condition medium,CM),观察在3种培养体系中,干细胞的增殖和分化情况.发现3种培养体系中的hESCs都可以表达一致的生物学特性,但也有不同之处,相对于CM干细胞在MEFs和HAFi饲养层体系的分化率低,增殖快;但MEFs来源于鼠类是异源细胞,HAFi虽不含鼠源性成分却繁殖很慢;无饲养层的体系便于操作,无外源细胞存在.实验所得出的结果可以引导研究人员针对于临床、科研不同的需要,选择最适合的培养体系.

    【关键词】 人胚胎干细胞 培养体系 无饲养层培养

    【基金】国家自然科学基金资助项目(30600188)

    【分类号】Q813

    人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)于1998年在美国率先建系[1],自此在全球掀起了研究的热潮.hESCs具有无限增殖的能力并可进行遗传学操作,同时目前人们通过对hESCs的诱导分化几乎可以得到人体各个系统的细胞[2~4].因此hESCs在药物筛选、研究人类发生发育、尤其
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     摘要：人胚胎干细胞(human embryonic stem cells，hESCs)的培养一直是干细胞研究的重要内容。用本实验室独立建系的两株hESC8，建立3种不同的培养体系：小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts，MEFs)做饲养层，永生化人成纤维细胞(immortalized human adult fibroblasts，HAFi)做饲养层，无饲养层条件培养基培养体系(condition medium，CM)，观察在3种培养体系中，干细胞的增殖和分化情况。发现3种培养体系中的hESCs都可以表达一致的生物学特性，但也有不同之处，相对于CM干细胞在MEFs和HAFi饲养层体系的分化率低，增殖快；但MEFs来源于鼠类是异源细胞，HAFi虽不舍鼠源性成分却繁殖很慢：无饲养层的体系便于操作，无外源细胞存在。实验所得出的结果可以引导研究人员针对于临床、科研不同的需要。选择最适合的培养体系。

    关键词：人胚胎干细胞；培养体系；无饲养层培养

    中图分类号：Q2-33 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2009)01-0001-05

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