应用接头PCR的方法扩增假attP位点
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欧海龙 黄英 上海交通大学医学遗传研究所;
【摘要】φC31整合酶可高效介导外源基因特异、稳定地与哺乳动物基因组发生重组反应,基因组中被整合的位点为假attP位点.运用接头PCR的方法对φC31整合酶介导的含有attB序列及表达绿色荧光蛋白(GFP)的载体在牛基因组中的一个新的特异整合位点(假attP位点)进行扩增,并且显示接头PCR技术在克隆与已知序列相邻的未知旁侧序列上其具有高效、特异、灵敏等特点.
【关键词】 接头PCR φC整合酶 假attP位点 牛基因组
【基金】国家“863”计划项目(2007AA100502)
【分类号】Q503
利用已知序列获得旁侧的未知序列的方法有多种,在PCR技术发明以前,主要通过筛选基因组文库的方法,即以已知序列(如目的基因)为探针,对转基因个体(动物或植物)的基因文库进行杂交,从而鉴定分离出旁侧序列.PCR技术出现以后,涌现出许多基于该技术的用于扩增旁侧未知序列的方法.接
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摘要：ψC3l整合酶可高效介导外源基因特异、稳定地与哺乳动物基因组发生重组反应，基因组中被整合的位点为假attP位点。运用接头PCR的方法对ψPC3l整合酶介导的含有attB序列及表达绿色荧光蛋白(GFP)的载体在牛基因组中的一个新的特异整合位点(假attP位。最)进行扩增，并且显示接头PCR技术在克隆与已知序列相邻的未知旁侧序列上其具有高效、特异、灵敏等特点。
关键词：接头PCR；ψC31整合酶；假attP位点；牛基因组
中图分类号：Q75 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2009)01-0011-05
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