A、O型FMDV T/B细胞抗原表位融合基因合成及植物表达载体构建
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2009年12月1日
口蹄疫病毒,B细胞表位基因,多表位融合基因,克隆载体,不同组合,酶切位点,中间载体,T、B细胞表位基因
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参见附件(3859KB，7页)。
肖旭倩 胡正龙 沈文涛 言普 周鹏 海南大学农学院;中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点实验室;
【摘要】人工合成A、O型FMDV的7个细胞表位基因,应用套叠PCR将其中5个T细胞表位基因融合为T,2个B细胞表位基因融合为B,分别克隆进pMD-18T载体,再利用同尾酶的酶切及连接构建了不同组合的克隆载体(pMD-BT/BTT),然后将克隆载体改造为中间载体(pMD-xsB/xsT/xsBT/xsBTT),最终获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xsT/xsBT/xsBTT).这为进行热研2号柱花草遗传转化及进一步研究同型与异型FMDV之间多表位基因的不同融合方式的免疫效果奠定了基础,为口蹄疫可饲植物疫苗的应用研究提供借鉴.
【关键词】 口蹄疫病毒 T、B细胞表位基因 多表位融合基因 植物表达载体构建 抗原表位 基因合成 克隆载体 不同组合 酶切位点 中间载体
【基金】国家973计划(2007CB108903) 中央级事业单位基本科研业务费资助
【分类号】S852.5
口蹄疫(Foot and Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、高度接触性传染病,被国际兽医局列为头号A类传染病[1].传统防疫方法是使用灭活疫苗及弱毒疫苗,但该类疫苗具有易散毒、病毒毒力返强等缺点,因此研
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摘要：人工合成A、O型FMDV的7个细胞表位基因，应用套叠PCR将其中5个T细胞表位基因融合为T，2个B细胞表位基因融合为B，分别克隆进pMD-18T载体，再利用同尾酶的酶切及连接构建了不同组合的克隆载体(pMD-BT/BTT)，然后将克隆载体改造为中间载体(pMD-xsB/xsT/xsBT/xsBTT)，最终获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xsT/xsBT/xsBTT)，这为进行热研2号柱花草遗传转化及进一步研究同型与异型FMDV之间多表位基因的不同融合方式的免疫效果奠定了基础。为口蹄疫可饲植物疫苗的应用研究提供借鉴。
关键词：口蹄疫病毒；T、B细胞表位基因；多表位融合基因；植物表达载体
中图分类号：S852.65+9.5；Q78 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2009)04-0296-07
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