从石蜡包埋组织中获取高质量基因组DNA的方法改进
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2009年12月1日
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刘水平 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心;
【摘要】从石蜡包埋组织中制备基因组DNA(gDNA)难度大、获取样本量很少.传统方法为二甲苯脱蜡法.为了简化操作,获得更高质量的gDNA,我们采用水浴法替代二甲苯进行脱蜡,亲和层析纯化石蜡包埋肝细胞癌(HCC)组织标本中基因组DNA,以纯化gDNA为模板PCR扩增看家基因.结果显示改良水浴法提取的gDNA质量、数量均显著高于传统二甲苯脱蜡法,PCR产物量也得到显著提高.与传统方法相比,改良水浴法简单、快捷,可以更有效的回收石蜡包埋组织中的gDNA.
【关键词】 石蜡包埋组织 聚合酶链反应 gDNA提取
【分类号】R730.2
肿瘤发病机理的基因组学或表观遗传学研究对临床标本的数量、质量提出了很高的要求.由于在短期内难以获得大量的新鲜肿瘤组织标本,故临床上收藏的石蜡包埋组织标本已成为宝贵的研究材料.但是,从石蜡包埋组织中制备基因组DNA的难度大,以往文献报道的制备方法可重复率低,只能获
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摘要：从石蜡包埋组织中制备基因组DNA(gDNA)难度大、获取样本量很少，传统方法为二甲苯脱蜡法，为了简化操作，获得更高质量的gDNA，我们采用水浴法替代二甲苯进行脱蜡，亲和层析纯化石蜡包埋肝细胞癌(HCC)组织标本中基因组DNA，以纯化gDNA为模板PCR扩增看家基因，结果显示改良水浴法提取的gDNA质量、数量均显著高于传统二甲苯脱蜡法，PCR产物量也得到显著提高，与传统方法相比，改良水浴法简单、快捷，可以更有效的回收石蜡包埋组织中的gDNA。
关键词：石蜡包埋组织；聚合酶链反应；异DNA提取
中图分类号：R737.31 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2009)04-0343-03
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