Mtss1抗体制备及小脑中不同亚型磷酸化水平的检测
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石妮 毛亚江 张敬敬 蒋鹏 王迎 湖南师范大学生命科学学院;
【摘要】肿瘤转移抑制蛋白(Metastasis suppressor1,Mtss1),又名肿瘤转移消失蛋白(Missing in metastasis,MIM)在小脑神经元发育中受到调控,依次表达两种亚型:包含Src磷酸化位点的广泛表达亚型;含Src磷酸化位点片段经RNA剪接去除的神经元特异亚型.为检测这两种Mtss1亚型的酪氨酸磷酸化水平是否因Src磷酸化位点的去除存在明显区别,制备了灵敏度较高并可特异性沉淀外源和内源表达的Mtss1的兔多克隆抗体,对发育时期与成年大鼠小脑内源Mtss1酪氨酸磷酸化水平进行检测,发现成年后的Mtss1与出生后发育时期的Mtss1均发生明显的酪氨酸磷酸化,表明剪接去除包含有Src磷酸化位点中的神经元特异亚型中,还有其他的酪氨酸残基被磷酸化,提示其他酪氨酸磷酸化激酶信号通路对Mtss1神经元亚型的调控作用.
【关键词】 肿瘤转移抑制蛋白 抗体 大鼠 小脑 酪氨酸磷酸化
【基金】国家自然科学基金资助项目(3080551) 湖南师范大学科研启动基金项目
【分类号】R741
肿瘤转移抑制蛋白Mtss1是一个细胞骨架蛋白[1～4].它最初被鉴定为在特定肿瘤转移中消失的蛋白,随着乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌的转移程度增高而表达降低[1,5～7].细胞学功能研究表明Mtss1的过量表达对细胞形态的影响很明显,如在成纤维细胞系中诱导类似丝状伪足和片状伪足的结构
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摘要：肿瘤转移抑制蛋白(Metastasis suppressor1，Mtss1)，又名肿瘤转移消失蛋白(Missinginmetastasis，MIM)在小脑神经元发育中受到调控，依次表达两种亚型：包含src磷酸化位点的广泛表达亚型：合src磷酸化位点片段经RNA剪接去除的神经元特异亚型，为检测这两种Mtss1亚型的酪氨酸磷酸化水平是否因Src磷酸化位点的去除存在明显区别，制备了灵敏度较高并可特异性沉淀外源和内源表达的Mtss1的兔多克隆抗体，对发育时期与成年大鼠小脑内源Mtss1酪氨酸磷酸化水平进行检测，发现成年后的Mtss1与出生后发育时期的Mtss1均发生明显的酪氨酸磷酸化，表明剪接去除包含有Src磷酸化位点中的神经元特异亚型中，还有其他的酪氨酸残基被磷酸化，提示其他酪氨酸磷酸化激酶信号通路对Mtss1神经元亚型的调控作用。
关键词：肿瘤转移抑制蛋白；抗体；大鼠；小脑；酪氨酸磷酸化
中图分类号：Q28 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2010)01-0001-05
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