转录因子AP-2β与SLP-2的蛋白相互作用
AP-β,相互作用蛋白,免疫荧光分析,免疫共沉淀
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王义军 徐甜 胡翔 向双林 周建林 张健 韩梅 湖南师范大学生命科学学院 蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室;湖南师范大学生命科学学院 蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室v中国湖南长沙410081;
【摘要】AP-2β是转录因子AP-2家族中的重要一员.AP-2是一个与哺乳动物的发育、细胞生长、分化、凋亡和肿瘤发生都有密切联系的重要的转录因子家族.最近的研究表明,AP-2能通过与其他蛋白的相互作用来调控AP-2下游基因的转录活性.采用免疫共沉淀结合质谱鉴定的方法筛选与AP-2β相互作用的蛋白.结果筛选到Stomatin like protein2(SLP-2)蛋白可能与AP-2β相互作用.免疫共沉淀实验证实外源过表达和内源的SLP-2蛋白都能与AP-2β蛋白相互作用.而且,细胞免疫荧光实验发现外源表达的Myc-AP-2β蛋白与内源的SLP-2蛋白在MCF-7细胞的胞质中有共定位.此外,免疫印记实验结果表明过表达SLP-2能上调AP-2β的蛋白水平,这就表明SLP-2与AP-2β相互作用后,SLP-2可能使AP-2β蛋白更稳定.这些研究结果为进一步研究这两个基因的功能提供了新的切入点.
【关键词】 AP-β 相互作用蛋白 SLP- 免疫荧光分析 免疫共沉淀
【基金】国家973资助项目(2005CB522505) 国家973资助项目(2006CB943506) 湖南省科技厅资助项目(2007CK3052) 湖南省教育厅资助项目(07c563)
【分类号】Q75
AP-2是一个功能重要的转录因子家族,大量研究表明该家族在哺乳动物的胚胎发育、细胞分化和肿瘤发生等方面都有重要的调控作用.这一家族的成员包括AP-2α,AP-2β,AP-2γ,AP-2δ和AP-2ε.AP-2的家族成员之间有较高的同源性和序列的相似性,它们自身或相互之间形成同源或异源二聚
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摘要：AP-2β是转录因子AP-2家族中的重要一员，AP-2是一个与哺乳动物的发育、细胞生长、分化、凋亡和肿瘤发生都有密切联系的重要的转录因子家族，最近的研究表明，AP-2能通过与其他蛋白的相互作用来调控AP-2下游基因的转录活性，采用免疫共沉淀结合质谱鉴定的方法筛选与AP-2β相互作用的蛋白，结果筛选到Stomatin like pmtein 2(SLP-2)蛋白可能与AP-2β相互作用，免疫共沉淀实验证实外源过表达和内源的SLP-2蛋白都能与AP-2β蛋白相互作用，而且，细胞免疫荧光实验发现外源表达的Myc-AP-2β蛋白与内源的SLP-2蛋白在MCF-7细胞的胞质中有共定位，此外，免疫印记实验结果表明过表达SLP-2能上调AP-2β的蛋白水平，这就表明SLP-2与AP-2β相互作用后，SLP-2可能使AP-2β蛋白更稳定，这些研究结果为进一步研究这两个基因的功能提供了新的切入点。
关键词：AP-2β；相互作用蛋白；SLP-2；免疫荧光分析；免疫共沉淀
中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2010)01-0016-05
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