转山菠菜胆碱单加氧酶基因(AhCMO)水稻创制及其耐盐性研究
AhCMO基因,Bar基因,过表达,转基因
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罗伯祥 肖自友 邓力华 陈芬 陈受宜 李文彬 肖国樱 中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室;江苏徐淮地区淮阴农科所;中国科学院研究生院;湖南农业大学;中国科学院遗传与发育生物学研究所;
【摘要】胆碱单加氧酶(Choline monooxygenase,CMO)是高等植物体内合成甜菜碱的一个关键酶.利用载体pCAMBIA3300与玉米泛素(Ubiquitin)启动子构建了AhCMO基因的过表达载体.采用基因枪轰击愈伤组织细胞将AhCMO基因转化东稻3号(OryzasativaL.subsp.japonica Kato),经抗性筛选,获得再生苗18株,选取农艺性状与野生型基本一致的其中7株进行PCR与Southern杂交检测,获得3株转AhCMO基因阳性植株;RT-PCR的检测结果表明外源AhCMO基因能正常转录;草铵膦叶片涂布试验结果表明,Bar基因在转AhCMO基因水稻植株中能正常表达;对T1代转基因再生植株进行0.5%NaCl高盐处理,结果表明,4号、7号转AhCMO基因水稻耐盐性强于非转基因对照,说明外源AhCMO基因能提高东稻3号的耐盐性.
【关键词】 AhCMO基因 Bar基因 过表达 转基因 水稻 耐盐性
【基金】国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2008ZX08001-003) 国家科技支撑计划区域项目(2007BAD77B03) 中国科学院知识创新工程重大项目(KSCX1-YW-03)
【分类号】S511
干旱和盐碱是水稻生产过程中常见非生物逆境,甜菜碱(Betaine)在植物中的积累可以提高植物耐旱、耐盐能力.甜菜碱为四甲基胺类化合物,是细菌、植物、动物等生物体中起渗透保护作用的最主要的细胞相溶性物质.甜菜碱在细胞质中逐渐积累达到一定水平后可调节渗透压,维持细胞的水
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摘要：胆碱单加氧酶(Choline monooxygenase，CMO)是高等植物体内合成甜菜碱的一个关键酶，利用载体pCAMBIA3300与玉米泛素(Ubiquitin)启动子构建了AhCMO基因的过表达载体，采用基因枪轰击愈伤组织细胞将AhCMO基因转化东稻3号(Oryza sativa L.subsp japonica Kato)，经抗性筛选，获得再生苗18株，选取农艺性状与野生型基本一致的其中7株进行PCR与Southern杂交检测，获得3株转AhCMO基因阳性植株：RT-PCR的检测结果表明外源AhCMO基因能正常转录；草铵膦叶片涂布试验结果表明。Bar基因在转AhCMO基因水稻植株中能正常表达；对T1代转基因再生植株进行0.5%NaCl高盐处理，结果表明，4号、7号转AhCMO基因水稻耐盐性强于非转基因对照，说明外源AhCMO基因能提高东稻3号的耐盐性。
关键词：AhCMO基因；Bar基因；过表达；转基因；水稻；耐盐性
中图分类号：Q812 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2010)03-0219-07
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