血管内皮细胞MICA基因mRNA和蛋白质表达
人脐带静脉血管内皮细胞,流式细胞术,免疫印迹
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邹义洲 秦志强 罗奇志 霍治 余平 中南大学基础医学院免疫学系;德克萨斯大学西南医学中心内科学系;
【摘要】MICA系MHC-I类相关多态性基因A,其表达细胞膜蛋白质分子与器官移植免疫排斥有关.新生儿脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)被分离和培养至4～6代.11例新分离培养的HUVEC和7种人细胞株的MICAmRNA转录水平用RT-PCR检测,应用细胞流式检测细胞膜表面的MICA分子的表达情况,同时应用免疫印迹的方法对整个细胞MICA蛋白质的表达水平进行检测和分析.结果显示MICAmRNA在所有检测细胞中有表达,HUVEC细胞膜或胞浆中MICA蛋白质表达量很高,而在人体淋巴细胞膜表面和胞内未检出MICA分子的表达.提示HUVEC和淋巴细胞在MICA表达的差异性可能与不同细胞的内部调节机制有关.而供体器官血管内皮细胞表达多态性MICA分子有可能成为移植抗原发生免疫排斥反应.
【关键词】 MICA 人脐带静脉血管内皮细胞 流式细胞术 免疫印迹
【基金】国家自然科学基金资助项目(30870135)
【分类号】R392.13
MICA分子是由人类第6对染色体短臂中位于MHC复合体I类基因靠近HLA-B座位的MICA基因编码表达的MHC-I类相关的多态性细胞膜糖蛋白质,由信号肽、细胞外结构(α1,α2,α3)、跨膜区和胞浆尾巴组成.其空间结构与HLA-I类分子相似,但不与β2微球蛋白结合[1].图1脐带血管内皮细胞分离
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摘要：MICA系MHC-I类相关多态性基因A，其表达细胞膜蛋白质分子与器官移植免疫排斥有关，新生儿脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)被分离和培养至4～6代，11例新分离培养的HUVEC和7种人细胞株的MICA mRNA转录水平用RT-PCR检测，应用细胞流式检测细胞膜表面的MICA分子的表达情况，同时应用免疫印迹的方法对整个细胞MICA蛋白质的表达水平进行检测和分析，结果显示MICA mRNA在所有检测细胞中有表达。HUVEC细胞膜或胞浆中MICA蛋白质表达量很高，而在人体淋巴细胞膜表面和胞内未检出MICA分子的表达，提示HUVEC和淋巴细胞在MICA表达的差异性可能与不同细胞的内部调节机制有关，而供体器官血管内皮细胞表达多态性MICA分子有可能成为移植抗原发生免疫排斥反应。
关键词：MICA：人脐带静脉血管内皮细胞；流式细胞术；免疫印迹
中图分类号：R392.13 文献标识码：A 文章编号：1007-7847(2010)03-0240-06
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