以HIV-1为骨架的慢病毒载体在其假病毒的转录本中保留其内含子不被剪切
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2011年3月1日
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参见附件。
张帆 方彧聃 张敬之 上海交通大学医学遗传研究所;上海交通大学附属儿童医院;
【摘要】通过在FUGW中克隆入各外源基因表达盒,如红系特异表达人β珠蛋白(HBG),或山羊乳腺特异表达人血清白蛋白(pBLG-ALB)等,研究以HIV-1为骨架的慢病毒载体FUGW在其假病毒的转录本中内含子的剪切情况.将慢病毒载体制备成假病毒后抽提其病毒RNA,通过逆转录和PCR验证其内含子剪切保留情况;同时,在相对应的慢病毒假病毒介导的转基因小鼠中也进行类似的PCR验证.在制备假病毒的转录过程中,其外源基因所携带的內含子在病毒所包含的基因组RNA中被部分保护不被剪切,且优先保护5′端的内含子.此现象正好与野生型HIV-1的保护顺序相反.
【关键词】 艾滋病毒 慢病毒载体 内含子 剪切 剪切保护
【基金】国家自然科学基金资助项目(30870943) 上海市自然科学基金资助项目(11ZR1429900)
【分类号】Q752
慢病毒载体是在慢病毒的基础上通过基因删减构建而成的,其中,以HIV-1为骨架的慢病毒载体被研究得最为透彻,现今已被研发至第4代慢病毒载体[1].慢病毒载体因其安全性高,表达稳定,以及既能感染分裂细胞又能感染静息细胞等优势[2],是潜在的基因治疗和转基因动物研究的良好工具.HI
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