显微受精废弃的人类卵母细胞体外成熟及孤雌激活
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2011年3月1日
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徐小明 陆长富 周虹 林戈 卢光琇 中南大学生殖与干细胞工程研究所;中南大学人类干细胞国家工程研究中心;中信湘雅生殖与遗传专科医院;
【摘要】以卵胞浆单精注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后废弃的未成熟人类卵母细胞(生发泡期卵母细胞(the germinal vesicle,GV)和第一次减数分裂中期卵母细胞(the metaphase,MI))为材料,使用卵母细胞体外成熟培养液培养未成熟的卵母细胞,分别在人类绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,hCG)注射后45、60、84 h观察卵母细胞成熟情况.分别使用钙离子载体(calcium ionophore,CI)A23187联合6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)法或精子提取物卵胞质内注射(sperm extracts intracytoplasmic injection,SEII)法两种不同的激活方法对体外成熟MII的卵母细胞进行孤雌激活,评价其体外发育潜能.MI卵子体外成熟率要显著高于GV(75.2%vs 30.6%)(P0.01).与CI/6-DMAP法相比使用SEII/6-DMAP法在激活率(87.5%vs 70.2%)上要明显高于CI/6-DMAP法(P0.05),但在卵裂率(65.7%vs 72.5%)和桑囊率(0%vs 5.0%)上SEII/6-DMAP法要低于CI/6-DMAP法.注射hCG 45 h组的卵母细胞激活率(91.3%vs 57.9%)、卵裂率(85.7%vs 57.9%)及桑囊率(9.5%vs 0%)均显著高于注射hCG 60 h组(P0.01).56.8%(117/206)的ICSI废弃的未成熟卵母细胞可以在体外发育成熟,激活后具有一定的发育潜能,卵龄对卵母细胞的质量和发育能力影响较大.
【关键词】 卵母细胞 体外成熟 孤雌激活
【基金】国家自然科学基金资助项目(30800650) 湖南省自然科学基金资助项目(09JJ4010)
【分类号】R329
目前,人类体细胞核移植研究停滞不前,除了核移植技术本身原因之外,由于伦理及法规的限制,人类卵子的获得极为困难是制约其进展的主要瓶颈之一.卵胞浆单精注射(intracytoplasmicsperm injection,ICSI)患者治疗后未成熟卵母细胞的获取相对容易,理论上可以解决人类体细胞核移植
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