斑马鱼心脏发育候选基因Pygo1多克隆抗体的制备及检测
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2011年4月1日
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唐雄卓 江志钢 赵碧峰 李发祥 谢华平 邓云 吴秀山 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心;
【摘要】Pygo1是心脏发育候选基因,可能在斑马鱼心脏发育过程中起着重要的调控作用.利用生物信息学选择斑马鱼Pygo1基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pGEMT-4T-1载体中,转入E.coli中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)分别诱导表达GST融合蛋白.蛋白经纯化分离后用于免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western Blot检测抗体的效价和特异性.
【关键词】 Pygo基因 斑马鱼 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金资助项目(30930054)
【分类号】Q78
Pygo1与Wnt信号途径有着紧密的联系.Wnt蛋白是一类由原癌基因Wnt编码的非常保守的分泌信号分子,通过自分泌或者旁分泌发挥作用.其序列长度约为350~380个氨基酸.现在已经发现脊椎动物中至少存在20种Wnts蛋白家族成员[1,2],它们通过激活靶细胞内的信号通路从而调控细胞的增殖、
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