骨髓间充质干细胞移植在小鼠急性肾损伤肾内的存活与分化情况研究
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2011年6月1日
骨髓间充质干细胞(MSCs),缺血再灌注
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齐玉增 苟欣 周青松 杨平 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科;
【摘要】为探讨急性肾损伤后,移植骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)在损伤肾内的存活能力及分化情况,通过复苏、扩增培养已完成鉴定、经慢病毒EGFP转染的MSCs,观察备用MSCs的EGFP(enhanced green fluorescent protein)表达情况,采用雄性C57BL/6J小鼠12只建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型后(结扎双侧肾蒂40 min后开放血流并经尾静脉注射MSCs),分别于第1、3、7、14 d处死3只小鼠,采集小鼠左侧肾脏制作石蜡切片,倒置荧光显微镜下观察MSCs在肾内的存活及分化情况,定量分析每个时间点存活于肾内的数目的差异.结果表明复苏、扩增培养出的MSCs增殖活力旺盛,成功建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型.移植的细胞随时间的延长,存活于肾脏内的数量显著减少(第14 d存活于肾内的细胞数量仅为移植后第1d的1/5),第1、3、7、14 d表达EGFP的MSCs主要分布于肾小球周围、肾脏小血管内壁、肾小管与肾小管之间的间质而肾小管内壁未见到表达EGFP的MSCs分布.这说明移植的MSCs在缺血再灌注损伤后肾脏内能够存活,但肾脏内的微环境限制了移植细胞的存活能力.在肾小管内壁未观测到表达EGFP的MSCs,提示MSCs对肾脏修复的途径不是直接向肾小管内皮细胞分化而另有其它途径.
【关键词】 骨髓间充质干细胞(MSCs) 缺血再灌注 存活 分化
【分类号】R692
骨髓间充质干细胞以其强大的增殖能力与多向分化能力[1~3]被誉为组织工程最具应用前景的细胞之一.目前,骨髓来源的间充质干细胞(mar-row mesenchymal stem cells,MSCs)在肾脏缺血再灌注损伤中的治疗修复作用已被诸多学者证实.Morigi等[4]在用顺铂构建的急性肾衰竭大鼠模型中,
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