不同方法处理供核细胞对细胞周期和重构胚发育的影响
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2012年2月1日
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蔡琳琳 阮井玲 王娟 曲立娟 李华 黄英 上海市儿童医院上海医学遗传研究所;卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市生殖与胚胎工程重点实验室;
【摘要】利用流式细胞仪和细胞染色体核型分析技术,比较奶牛的转基因体细胞和正常细胞经血清饥饿、抑制培养周期同步化处理后的G0/G1期细胞比例;并将同步化处理的核供体细胞进行核移植,然后统计囊胚发育率.结果表明,血清饥饿和抑制培养均能获得较高比例的G0/G1期细胞,两组间差异不显著(P0.05),但均显著高于未处理对照组(P0.05);血清饥饿组的囊胚率显著高于抑制培养组和非处理对照组(P0.05);但细胞同步化处理6 d后细胞染色体核型异常率增加.因此,要获得正常核型的G0/G1核移植供体细胞和较高的囊胚率,同步化处理时间以不超过4 d为宜.
【关键词】 供核细胞 G/G期 同步化 体细胞核移植
【基金】国家科技重大专项项目(2009ZX08007-003B) 上海市研发基地协作能力建设专项项目(08DZ2200600)
【分类号】Q813
体细胞克隆技术经历了十多年的发展,已经在很多动物上获得成功[1~9].体细胞克隆技术在扩繁有经济价值的动物或珍稀动物种方面具有重大的经济和社会效益;将克隆技术与转基因技术有机地结合起来,可加速提高家畜的生产性能和繁育优良品种,并使转基因动物生物反应器的研发具有巨
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