外源基因转染山羊体细胞的整合效率研究
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2013年1月1日
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蔡琳琳 蔡勤 许淼 黄英 上海市儿童医院 上海医学遗传研究所;上海市儿童医院 卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市生殖与胚胎工程重点实验室;
【摘要】为了探讨影响山羊体细胞中外源基因整合效率的因素,采集胎羊和小羊皮肤并制备成纤维细胞,采用"Lipofectamine LTX"脂质体转染试剂包埋外源基因,分别导入上述细胞中,比较同一种外源基因载体(人凝血因子Ⅸ)转染至不同个体和类型的羊细胞,以及不同载体(人凝血因子Ⅸ、人转铁蛋白和牛催乳素)转染至同一个体羊细胞的整合效率的差异.通过药物筛选得到单细胞簇,经定量PCR计算外源基因的整合效率.同一种外源目的基因载体转染小羊成纤维细胞的整合效率显著高于胎羊成纤维细胞(P0.05);而不同目的基因载体转染同一个体羊细胞,其细胞的整合效率与转染载体的片段大小有关.由此可知,小羊成纤维细胞外源基因整合频率优于胎羊细胞,且载体片段的大小影响外源基因转染的整合频率.
【关键词】 基因转染 山羊体细胞 整合效率 体细胞核移植技术
【基金】国家科技重大专项资助项目(2009ZX08007-003B)
【分类号】S827
Study on Integration Efficiency of Foreign Genes Transfecting toGoat Somatic CellsCAI Lin-lina,b,CAI Qina,b,XU Miaoa,b,HUANG Yinga,b*(a.Shanghai Institute of Medical Genetics,Children’s Hospital of Shanghai;b.Key Laboratory of Medical Embryo and Molecul
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