1.3稳定表达Syncytin的EL4细胞系的建立

    1.3.1EL4细胞的培养和质粒转染

    ELA细胞在含10%胎牛血清的1640培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。参照罗氏转染试剂盒说明书分别完成重组载体pIRES2 -syn-cytin-EGFP和空载体pIRES2-EGFP的转染。1)转染前4h，将处于对数生长期的EIA细胞以lx105密度铺于24孔板，使细胞汇合度至80%～90%；2)转染前用无血清无双抗1640洗涤细胞；3)50μL OPTI-MEM分别稀释0.5μg DNA，室温孵育5min；4)50μL OPTI-MEM分别稀释1.5μL X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent，室温孵育5min；5)将3)、4)中的液体混合，室温孵育15～20min；6)将转染复合物逐滴加入细胞孔板中，轻柔震荡混匀，放人37℃、5% CO2培养箱培养；7)转染48h后荧光显微镜下观察荧光。

    1.3.2稳定表达Syncytin的EL4细胞系的获得

    将对数生长期的EL4细胞接种于24孔板 ......