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编号:12728478
稳定表达Syncytin的EL4细胞系的建立及鉴定(1)
http://www.100md.com 2014年3月1日 《生命科学研究》 2014年第3期
稳定表达Syncytin的EL4细胞系的建立及鉴定,Syncytin蛋白,pIRES2-EGFP质粒,真核表达载体,白血病
     摘要:Syncytin是人类内源性逆转录病毒W家族的囊膜蛋白。近期研究发现Syncytin与白血病密切相关。为研究Syncytin的生物学功能,我们克隆了人syncytin,并连接到pIRES2-EGFP质粒上,转化该质粒至感受态大肠杆菌DH5a,挑选阳性克隆进行PCR、酶切电泳和DNA测序鉴定,成功构建了表达syncytin基因的真核表达载体。利用罗氏转染试剂转染重组质粒至EL4细胞,并通过G418选择性培养基筛选,在荧光显微镜下观察细胞中Syncytin表达,用RT-PCR、Western blot检测Syncytin表达水平,结果显示我们成功构建了稳定表达人Syncytin的ELA细胞系。稳定表达人Syncytin的EL4细胞系的建立,为进一步研究人Syncytin功能及其与白血病免疫逃逸的关系提供了重要的细胞模型和实验基础。

    关键词:Syncytin蛋白;pIRES2-EGFP质粒;真核表达载体;EL4细胞;白血病

    中图分类号:Q786

    文献标识码:A

    文章编号:1007-7847(2014)03-0205-06

    人内源性逆转录病毒(human endogenousretrovlruses ......
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