摘要：HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列，设计特异性引物，通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列，并进行TA克隆、测序及序列分析；构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA，转入E.coli Rosetta(DE3)中，并在37℃、1.Ommol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明，GrHMA基因是HMA超家族的成员；GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明，CrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。

    关键词：滇龙胆；GrHMA基因；克隆；原核表达

    中图分类号：Q786

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2014)03-0211-07

    滇龙胆(Gentiana rigescens)为龙胆科(Gen-tianaceae)龙胆属多年生宿根草本植物 ......