摘要：以豌豆植物为实验材料建立了一种瞬时表达外源蛋白的新方法一发芽种子真空侵染法。以绿色荧光蛋白作为报告基因对该体系进行优化的结果表明其最佳工作条件为：菌体工作液浓度OD600=1.0～1.5，真空压力0.08MPa，真空侵染时间1min。该方法操作简单，可以同时侵染大量的豌豆植物材料，并将实验周期缩短为15d，植物侵染后12～14d可收获外源蛋白，外源蛋白表达量与叶片注射法相当，是一种在豌豆植物中批量生产外源蛋白的新方法。

    关键词：豌豆；瞬时表达；发芽种子；真空侵染

    中图分类号：Q819

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2014)03-0218-04

    豌豆植物早褐病毒(pea early browning virus，PEBV)是一种寄生在豌豆植物体内的双链RNA病毒，其中一条RNA链负责编码病毒外壳及与线虫传播相关的蛋白，而另外一条RAN链编码的蛋白则与病毒的移动和复制有关。目前经过人工改造的豌豆早褐病毒载体是一种研究豆科植物基因功能及在豆科植物中瞬时表达外源蛋白的有效工具[1] ......