摘要：为研究Profinity eXact系统在蛋白表达及纯化过程中的效果，利用PCR扩增绿色荧光蛋白基因egfp，定向克隆至表达栽体pPAL7上，转化BL21(DE3)，荧光显微镜下观察诱导后的重组菌；取超声破碎的上清挂柱纯化，紫外下检测纯化后egfp发出荧光的特性，Western blot分析其免疫反应性。结果表明：诱导后的重组菌pPAL7-egfp/BL21(DE3)在紫外光下能够发出绿色荧光；一步纯化后的egfp蛋白同样也能在紫外激发下发出绿色荧光，同时egfp蛋白能和特异性抗体结合，具有良好的免疫反应性。实验结果说明Profinity eXacl系统对于可溶性蛋白的表达和纯化，方法操作简单、快捷，具有很好的应用价值。

    关键词：纯化；Profinity eXact系统；egfp蛋白；原核表达

    中图分类号：Q789

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2014)04—0310-05

    蛋白纯化作为后基因组学时代研究蛋白质功能、结构最常用的手段 ......