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编号:12712406
松江湿地沉积物细菌T—RFLP分析中PCR体系的建立与优化(2)
http://www.100md.com 2014年4月1日 《生命科学研究》 2014年第4期
     2.2正交试验结果与分析

    按表l设计的16个PCR反应组合进行正交试验,扩增结果如图6所示。根据电泳检测结果,将16个处理按扩增条带强弱、背景颜色深浅和条带弥散程度打分。条带清晰亮度大、背景颜色浅、无弥散与特异性条带的最佳效果为16分,相反最差为1分。1~16组合的分数依次是:1、2、8、9、1、l、10、1、2、14、16、15、4、6、13、13。

    通过分数求出各列各水平的和,可求知各水平的平均值(见表2)。然后用各列最大平均值减最小平均值求出极差R,极差值越大表示该因素影响程度越大。由极差可知,PCR反应中各因素影响力大小依次为:Mg2+>DNA模板>Taq酶>dNTPs>引物 ......
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