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编号:12728617
鼠源抗人乳腺癌MRPl/ABCC1噬菌体Fab抗体库的构建(1)
http://www.100md.com 2014年4月1日 《生命科学研究》 2014年第4期
鼠源抗人乳腺癌MRPl,ABCC1噬菌体Fab抗体库的构建,多药耐药相关蛋白1,(MRPl,ABCCl)
     摘要:鼠源抗人乳腺癌多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein l,MRPl/ABCCl)噬菌体Fab抗体库的构建首先是利用乳腺癌组织匀浆液作为免疫原免疫BALB/e小鼠,成功免疫后提取小鼠脾组织的总RNA逆转录为cDNA。然后设计小鼠IgG各亚型的特异性Fab引物,PCR扩增Fd和L基因并依次连接到噬菌体载体pComb3中。重组体pComb3-Fab转化至E.coli XLl-Blue菌中,最后经辅助噬菌体VCSM13超感染.成功构建噬菌体Fab抗体库。以化学合成的MRPl/ABCC1膜表位10肽为抗原进行3轮淘选、富集,对淘选后获得的各级噬菌体抗体库进行ELISA检测和鉴定。成功获得的抗MRPl/ABCCl-10肽三级噬菌体Fab抗体库将为抗人乳腺癌MRPl/ABCCl Fab抗体的制备提供保障。

    关键词:Fab抗体;多药耐药相关蛋白1 (MRPl/ABCCl);乳腺癌

    中图分类号:R392.12

    文献标识码:A

    文章编号:1007-7847(2014)04-0338-06

    乳腺癌是世界范围内危害女性健康的恶性肿瘤之一 ......
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